不同產(chǎn)地冬蟲夏草藥理作用研究.pdf

1、冬蟲夏草作為傳統(tǒng)中藥材自15世紀(jì)起就廣為人知，并在亞洲國家廣泛應(yīng)用。經(jīng)現(xiàn)在藥理科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，冬蟲夏草含有許多有價值的藥用成分。僅青藏高原等高海拔地區(qū)才有冬蟲夏草。眾所周知，不同產(chǎn)地來源、產(chǎn)收季節(jié)、藥用部位等因素都對中藥材品質(zhì)影響巨大。因此，本文選取青海和西藏兩個不同產(chǎn)地的冬蟲夏草作為研究對象，從冬蟲夏草中核苷類和蟲草素含量、重金屬含量和存在的化學(xué)形態(tài)、不同產(chǎn)地冬蟲夏草對四氯化碳（Carbon Tetrachloride,CCL4）所致大

2、鼠肝損傷的保護作用、不同產(chǎn)地冬蟲夏草對慶大霉素誘導(dǎo)的大鼠腎損傷的保護作用、不同產(chǎn)地冬蟲夏草增強小鼠免疫功能五個方面來考察比較這兩個不同產(chǎn)地冬蟲夏草的藥理作用。
　　目的:研究冬蟲夏草中鉛、砷、汞、鎘四種重金屬存在形態(tài)，可為冬蟲夏草中重金屬的毒性和機體吸收程度等進一步研究提供參考依據(jù)。同時，考察青海和西藏兩個不同產(chǎn)地冬蟲夏草中核苷類、蟲草素的含量和重金屬含量的差異，對CCL4所致大鼠肝損傷和慶大霉素建立的腎損傷模型的保護作用以及對C

3、57BL/6小鼠免疫功能的影響，綜合比較評價這兩個產(chǎn)地冬蟲夏草的質(zhì)量，選出品質(zhì)更為優(yōu)良的產(chǎn)地，為冬蟲夏草原藥材的選擇和進一步開發(fā)研究提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:通過高效液相法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)分析冬蟲夏草中核苷類和蟲草素的含量。對于重金屬的含量測定，鉛、鎘均是采用原子吸收分光光度法，砷采用氫化物原子熒光光度法，汞采用原子熒光光譜分析法。采用化學(xué)試劑逐步提取法結(jié)

4、合原子吸收及原子熒光法分析研究冬蟲夏草中鉛、砷、汞、鎘的化學(xué)形態(tài)及其含量。然后，將大鼠分為空白組，模型組，青海和西藏冬蟲夏草低、中、高劑量組，共8個組，分別建立CCL4誘導(dǎo)的急性肝損傷模型和硫酸慶大霉素誘導(dǎo)的急性腎損傷模型，研究兩個不同產(chǎn)地冬蟲夏草對大鼠急性肝損傷和腎損傷的保護作用。最后，以C57BL/6小鼠為研究對象，考察兩個不同產(chǎn)地冬蟲夏草對小鼠細(xì)胞免疫、體液免疫、單核-巨噬細(xì)胞功能和NK細(xì)胞活性的影響。
　　結(jié)果:高效液相色

5、譜法可以同時測定冬蟲夏草中腺苷、尿苷、鳥苷、肌苷、尿嘧啶和蟲草素的含量，四種重金屬鉛、鎘、砷、汞含量分別是西藏：0.076,0.061,0.38,0.0062 mg·kg-1；青海：0.46,0.079,5.9,0.24 mg·kg-1?；瘜W(xué)形態(tài)分析結(jié)果表明Pb以鹽酸提取態(tài)為主；As主要以殘渣形式存在，其次是乙醇提取態(tài)和去離子水提取態(tài)；Hg基本為殘渣態(tài)；Cd含量很低，且主要是氯化鈉提取態(tài)。與模型組相比，兩個不同產(chǎn)地冬蟲夏草低、中、高三個

6、劑量組均能顯著降低大鼠血清AST、ALT水平，升高肝組織勻漿SOD、GSH水平（P<0.05），改善肝細(xì)胞壞死程度，但兩個不同產(chǎn)地間的差異并不顯著（P＞0.05）。與之類似，青海、西藏兩個產(chǎn)地給藥組與模型組相比，尿量明顯減少，NAG酶活性和尿總蛋白顯著降低，血肌酐與尿素氮的含量也明顯下降，且腎組織病理學(xué)形態(tài)明顯好于模型組。但這兩個產(chǎn)地給藥組之間相比，各項指標(biāo)無顯著性差異。此外，兩個不同產(chǎn)地冬蟲夏草高、中劑量組均能顯著提高ConA誘導(dǎo)的小

7、鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和碳廓清能力，腹腔巨噬細(xì)胞吞噬熒光微球能力以及NK細(xì)胞的活性，且與正常對照組相比，差異具有顯著性（P＜0.05）；兩個產(chǎn)地中劑量組均能明顯增加小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)，但高劑量組反而出現(xiàn)抑制現(xiàn)象（P＜0.05)；青海中、高劑量組顯著提高小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（Delayed type hypersensitivity，DTH）程度，而西藏冬蟲夏草無明顯作用，且青海高劑量組與西藏三個劑量組間存在顯著性差異（P＜0.05）；青海中、高