節(jié)旋藻分類學(xué)地位及生產(chǎn)性狀的分子標(biāo)記研究.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文節(jié)旋藻分類學(xué)地位及生產(chǎn)性狀的分子標(biāo)記研究姓名：黃暉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物物理學(xué)指導(dǎo)教師：汪志平20070501陣法構(gòu)建系統(tǒng)樹時(shí)，先將16SrRNA、16S23SITS、23SrRNA和cpcHID操縱子4個(gè)基因串成一個(gè)4084bp的串聯(lián)序列，再分析品系間該序列的相似性與遺傳距離，進(jìn)而構(gòu)建出親緣關(guān)系樹。(3)用兩種方法構(gòu)建的系統(tǒng)樹基本一致，整個(gè)系統(tǒng)樹分成界定明確的3大簇：第1簇由Sp1l單獨(dú)形成，第Ⅱ簇由Sp1、

2、Sp2、Sp6、Sp9、SpqO、81014和Spq8組成，第1II簇由Sp3、Sp4、Sp5、sp7、Sp一8、Sp15、sp16和Sp17組成。兩棵系統(tǒng)樹的主要差異在于第1I簇，超級(jí)矩陣法將該簇分成由Sp6、Sp14和Sp18組成的一個(gè)分支和spq、sp2、Sp9和Sp10組成的另一分支；而利用超級(jí)樹法，第n簇的所有品系組成同一支系。三、節(jié)旋藻生產(chǎn)性狀優(yōu)劣評(píng)價(jià)的若干分子標(biāo)記在多年研究與生產(chǎn)實(shí)踐的基礎(chǔ)上，建立了4種能簡(jiǎn)單、快速、有效初

3、步評(píng)價(jià)節(jié)旋藻生產(chǎn)性狀的分子標(biāo)記技術(shù)。分別如下：(1)以節(jié)旋藻生產(chǎn)性狀差的第1類品系與生產(chǎn)性狀好的第n類品系，在16S23SrRNAITS中堿基位點(diǎn)有顯著共性差異、分別位于1～50bp和281～400bp的序列(稱為ITSMarkerl和ITSMarker2)，作為生產(chǎn)性狀優(yōu)劣評(píng)價(jià)的分子標(biāo)記。(2)以節(jié)旋藻生產(chǎn)性狀差的第1類品系與生產(chǎn)性狀好的第1I類品系，CpcI第1～80位氨基酸序列中第7、20、30、56和72位的共性差異，作為生產(chǎn)性

4、狀優(yōu)劣評(píng)價(jià)的分子標(biāo)記。(3)以隨機(jī)引物$35和$99分別對(duì)生產(chǎn)性狀差的第1類和生產(chǎn)性狀好的第Ⅱ類節(jié)旋藻品系作RAPD擴(kuò)增顯示出的特征性差異條帶為標(biāo)記，評(píng)價(jià)節(jié)旋藻品系生產(chǎn)性狀的優(yōu)劣。即$35和$99的擴(kuò)增條帶分別為900bp和650bp者，屬第1類品系；擴(kuò)增條帶分別為680bp和900bp者，屬第1I類品系。(4)生產(chǎn)性狀差的第1類節(jié)旋藻品系的總DNA中只含1條exDNA，而生產(chǎn)性狀好的第1I類品系有2條exDNA，可以此作為分子標(biāo)記評(píng)價(jià)