鷹嘴豆D-松醇提取、酸解工藝及其活性研究.pdf

1、D-手性肌醇是細(xì)胞內(nèi)胰島素的調(diào)節(jié)介體，能夠加快糖原合成酶和丙酮酸脫氫酶的脫磷酸化作用，提高機(jī)體對胰島素的敏感性，降低胰島素抵抗的發(fā)生率。
　　鷹嘴豆能夠藥食兩用，我國有大面積種植區(qū)，其種子中含有D-松醇并且經(jīng)萌發(fā)處理之后能夠提高D-松醇的含量。D-松醇是D-手性肌醇的一種甲基化衍生物，屬于醚類化合物，經(jīng)強(qiáng)酸脫甲基作用可還原為醇，即D-手性肌醇。因此，本課題主要探討提取純化D-松醇、酸解轉(zhuǎn)化成D-手性肌醇的最優(yōu)工藝條件以及D-松醇的

2、降血糖活性。
　　首先對原材料鷹嘴豆進(jìn)行萌發(fā)處理，獲得D-松醇含量較高的鷹嘴豆豆芽，萌發(fā)天數(shù)為7.5天時(shí)是最佳采摘期，鷹嘴豆中D-松醇的含量達(dá)到3.75％。
　　通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)，得到提取D-松醇的最優(yōu)工藝條件，即提取溫度50℃、時(shí)間1.5h、料液比1∶20、提取液pH=5.0，經(jīng)高效液相色譜法檢測，提取液中D-松醇得率為3.685％。
　　選用陰陽離子交換樹脂201×7和001×4對鷹嘴豆D-松醇提取液進(jìn)行分

3、離純化，工藝條件為:最佳上樣濃度為12.00mg/mL，上樣量為30.00mL，以1.00BV/h的流速上樣，以1.00BV/h的流速洗脫。理論收集到D-松醇360mg，實(shí)際收集到318mg，得率為88.33％，經(jīng)高效液相色譜法檢測D-松醇純度為93.19％。
　　加入氫溴酸酸解轉(zhuǎn)化D-松醇，通過單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)確定最優(yōu)酸解轉(zhuǎn)化條件:即酸解溫度78.11℃、酸解時(shí)間5.37h、料液比為1∶19.15，預(yù)測的轉(zhuǎn)化率為93.86

4、％，考慮實(shí)驗(yàn)的可行性，最終確定反應(yīng)條件為:酸解溫度78℃，酸解時(shí)間5.40h，料液比1∶19，實(shí)際轉(zhuǎn)化率為90.76％，并通過高效液相色譜法和薄層層析色譜法對酸解轉(zhuǎn)化之后的樣品進(jìn)行定性分析。
　　利用活性炭對酸解之后的樣品進(jìn)行脫色處理，通過單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面分析得到最佳脫色條件，即脫色時(shí)間42min、脫色溫度14.91℃、活性炭添加量27.25mg(5g酸解樣品)，預(yù)測的D-手性肌醇樣品脫色率是96.72％，考慮實(shí)驗(yàn)的可行性，確定

5、實(shí)驗(yàn)條件為:脫色時(shí)間是42min，脫色溫度是15℃，活性炭添加量是27mg，實(shí)際脫色率為93.77％,經(jīng)高效液相色譜法測定樣本中D-手性肌醇純度為92.37％。
　　以高糖高脂飼料輔以小劑量STZ的方法建立Ⅱ型糖尿病小鼠模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行灌胃處理，D-松醇樣品（純度為92.19％）濃度分別為15mg/kg BW.、30mg/kg BW.、60mg/kg BW.。治療周期（32天）結(jié)束后，檢測結(jié)果為:1.患病小鼠出現(xiàn)體重下降、空腹血

6、糖水平、糖化血清蛋白含量升高的現(xiàn)象，經(jīng)D-松醇治療后，小鼠體重緩慢增長，空腹血糖水平以及糖化血清蛋白含量降低，說明D-松醇能夠控制小鼠血糖水平。2.患病小鼠的Cr和BUN水平升高，經(jīng)D-松醇治療后，小鼠Cr和BUN水平降低且，具有極顯著性(P＜0.01)，說明D-松醇能夠改善小鼠的腎功能。3.患病小鼠的糖耐量、肝糖原含量以及AST、ALT水平顯著升高，經(jīng)D-松醇治療后，糖耐量、糖原含量、ALT、AST水平降低，且具有顯著性(P＜0.05