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文檔簡介
1、作為一種新型的醫(yī)療技術,基因療法已應用于遺傳病和腫瘤等疾病的治療。而通過理想的載體將治療基因特異性遞送到病變的組織和細胞,是基因療法的前提和關鍵。構建安全高效、組織細胞特異性基因載體的是當前一個十分活躍的研究領域。
本研究以凝膠多糖和L-鳥氨酸為主要原料,首先根據(jù)Huisgen-click反應機理,合成了凝膠多糖的多鳥氨酸聚合物CTO,再以不同化學比例的乳糖酸修飾凝膠多糖接枝聚合物CTO,制備了一系列功能化配體聚合物(命名為C
2、TOL5%、CTOL10%和CTOL20%)。通過紅外、氫譜、碳譜和質譜表征確定結構,利用GPC確定CTOL5%、CTOL10%和CTOL20%的數(shù)均分子量(Mn)依次為24609,25503和27413 g/mol,綜合分析以上四種聚合物的粒徑分布、掃描電子顯微鏡和Zeta電位,結果表明:這些功能化聚合物在PBS緩沖溶液中可以形成球形納米粒子,并且具有較好的分散性,尤其是乳糖酸修飾的凝膠多糖聚合物可與DNA結合形成近似球形的結構緊密的
3、納米級粒子,平均粒徑大約在80 nm左右,有利于跨膜遞送。針對CTO、CTOL5%、CTOL10%和CTOL20%四種納米載體,做了較為系統(tǒng)的瓊脂糖凝膠電泳、細胞毒性、GFP-pDNA轉染、FITC-DNA轉染和siRNA遞送實驗,研究結果表明在氮磷比為3∶10時,CTO、CTOL5%、CTOL10%和 CTOL20%能很好地與dsDNA結合。且與CTO相比,CTOL5%、CTOL10%和CTOL20%具有很低的細胞毒性,其中CTOL2
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