端?？s短影響表皮分化及其機(jī)制.pdf

1、端粒由DNA重復(fù)序列（TTAGGG）n和相關(guān)蛋白組成，位于染色體末端，在維持基因組穩(wěn)定性和細(xì)胞增殖中起重要作用。端粒缺失或功能紊亂會(huì)導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定，易形成腫瘤，或引起細(xì)胞衰老與死亡，導(dǎo)致器官衰老。另外，端粒長(zhǎng)短也影響細(xì)胞分化，但其機(jī)制尚不是很清楚。端粒酶基因Terc缺失（Terc-/-）會(huì)導(dǎo)致端?？s短。Terc-/-小鼠代次遞增，端粒越來(lái)越短。我們首先利用畸胎瘤形成分化實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)不同端粒長(zhǎng)度的胚胎干(ES)細(xì)胞體內(nèi)分化能力。本實(shí)驗(yàn)所用

2、不同端粒長(zhǎng)度的五種小鼠ES細(xì)胞系分別為野生型（WT）N33（Terc+/+）、雜合的H1（Terc+/-）、F19（G1 Terc-/-）、F35（G3 Terc-/-）、A49（G4 Terc-/-）。WT的N33ES細(xì)胞系的端粒最長(zhǎng)，功能正常，（G1-G4) ES細(xì)胞的端粒依次縮短。畸胎瘤分化實(shí)驗(yàn)表明，端粒長(zhǎng)度不同并不明顯影響ES細(xì)胞向三個(gè)胚層分化的能力。但WT ES細(xì)胞形成的畸胎瘤明顯大于G4 Terc-/-ES細(xì)胞形成的畸胎瘤，

3、而且G4 Terc-/-畸胎瘤中的表皮組織明顯減少，初步表明端粒長(zhǎng)度可能影響表皮分化。對(duì)端粒酶敲除小鼠的皮膚進(jìn)行相關(guān)標(biāo)志基因的免疫熒光分析表明，G3 Terc-/-小鼠的表皮厚度明顯薄于WT小鼠的表皮，進(jìn)一步驗(yàn)證了端粒長(zhǎng)度可能影響體內(nèi)表皮分化。
　　為了探索端粒長(zhǎng)度對(duì)表皮分化影響的可能機(jī)制，我們將不同端粒長(zhǎng)度的ES細(xì)胞通過(guò)形成擬胚體的方式進(jìn)行了體外自發(fā)分化。盡管 ES細(xì)胞端?？s短后，可以向三胚層分化，但是表皮分化明顯受阻。并且表皮