胸腺肽β4對腎間質(zhì)轉(zhuǎn)分化的影響及其調(diào)節(jié)機(jī)制.pdf

1、背景：
　　腎纖維化以細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）在細(xì)胞外的大量聚積為特征，其主要包括腎小球硬化和小管間質(zhì)纖維化,它是各種慢性腎臟病（CKD）向終末期進(jìn)展過程中的一種共同病理表現(xiàn)。CKD的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)隨著衰老人群以及糖尿病、肥胖和高血壓病患病人數(shù)的增加而進(jìn)一步升高。近年來，眾多研究表明腎纖維化與CKD的進(jìn)展密切相關(guān)。腎纖維化的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的病理過程，是多方面因素的共同作用、多種細(xì)胞因子共同參與的結(jié)果。了解腎臟纖維化的發(fā)生機(jī)制，

2、將有助于抗纖維化的治療，延緩CKD進(jìn)展，極大減少終末期腎病的發(fā)生率及其并發(fā)癥，減輕其所造成的社會經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)?？鼓I臟纖維化治療近年來才引起重視，大多數(shù)治療尚處于實(shí)驗(yàn)研究階段。已證實(shí),上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為成纖維細(xì)胞或肌成纖維細(xì)胞（EMT）,是腎纖維化發(fā)生的重要機(jī)制，轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）是最強(qiáng)烈的致纖維化因子。腎小球的足細(xì)胞、壁層上皮細(xì)胞及腎小管的上皮細(xì)胞均可發(fā)生EMT。整合素鏈激酶（ILK）被認(rèn)為是控制腎小管上皮細(xì)胞EMT的關(guān)鍵細(xì)胞

3、內(nèi)調(diào)節(jié)劑，此外，已有研究證明ILK的上調(diào)是通過一個(gè)匯聚路徑導(dǎo)致足細(xì)胞EMT、轉(zhuǎn)移和功能失調(diào)。目前的研究證明，在SW480結(jié)腸癌細(xì)胞系中有胸腺肽β4基因的過度表達(dá)并伴隨著成纖維細(xì)胞形態(tài)的改變和細(xì)胞間的連接變得疏松；同時(shí)伴隨著E-鈣粘素（E－cadherin）表達(dá)明顯下降。E－cadherin是上皮細(xì)胞表型標(biāo)志蛋白，α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)是肌成纖維細(xì)胞的主要標(biāo)記物，E－cadherin的丟失和α-SMA的表達(dá)上調(diào)被認(rèn)為是EMT的主要

4、標(biāo)志。胸腺肽β4（Tβ4）是一種具有抗炎、促血管生成和傷口愈合作用的四肽，最近研究發(fā)現(xiàn)它在發(fā)生EMT的細(xì)胞中及硬化的腎小球中的表達(dá)是增加的，Tβ4可能通過介導(dǎo)ILK的上調(diào)而起到致纖維化的作用，但其降解產(chǎn)物氮乙酰絲氨酰天冬氨酰賴氨酰脯氨酸（Ac-SDKP）具有抗纖維化的作用，這說明 Tβ4和Ac-SDKP之間的平衡調(diào)節(jié)著腎纖維化的進(jìn)展。
　　目的：
　　研究Tβ4在腎小管上皮細(xì)胞EMT后的表達(dá)變化和其與Ac-SDKP之間的關(guān)系

5、，進(jìn)一步揭示腎纖維化的發(fā)生機(jī)制，為抗纖維化的藥物研究提供新方向，延緩CKD進(jìn)展至慢性腎衰竭。
　　方法：
　　選擇我院44例病理學(xué)證實(shí)為慢性腎盂腎炎、FSGS、腎炎伴間質(zhì)纖維化、輕微病變的患者作為病例組，8例正常健康人為對照組，用ELISA試劑盒檢測尿液中Tβ4的含量；另選擇8例因外傷進(jìn)行腎切除患者的正常腎組織作為正常對照，通過腎組織免疫組化染色的方法檢測腎組織中α-SMA和Tβ4的表達(dá)；再用TGF-β1刺激體外大鼠的腎小管

6、上皮細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化為肌成纖維細(xì)胞，及予Ac-SDKP進(jìn)行干預(yù)后，通過細(xì)胞免疫組化的方法檢測細(xì)胞α-SMA和Tβ4表達(dá)情況的變化，探討Tβ4在EMT的作用及與Ac-SDKP的關(guān)系。結(jié)合臨床資料、尿腎臟功能的測定,用SPSS軟件系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　ELISA結(jié)果顯示，病例組患者尿液中 Tβ4的含量是高于正常對照組，尤其是慢性腎盂腎炎組。免疫組化結(jié)果示病例組與對照組相比，α-SMA和Tβ4的表達(dá)明顯增加，兩組間差

7、異有顯著性，且染色深淺與纖維化程度成正比；細(xì)胞免疫組化結(jié)果顯示，與空白對照組相比，TGF-β1刺激組α-SMA和Tβ4的表達(dá)顯著增加，但Ac-SDKP干預(yù)組，α-SMA和Tβ4的表達(dá)下降，且對Ac-SDKP有濃度依賴性，濃度越高，下降越明顯，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　Tβ4在硬化的腎小球、纖維化的腎小管、腎間質(zhì)纖維化區(qū)域及成纖維細(xì)胞中的表達(dá)是增加的，說明 Tβ4有致纖維化可能；在發(fā)生 EMT的腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)