胸腺肽β4對腎間質轉分化的影響及其調節(jié)機制.pdf

1、背景：
　　腎纖維化以細胞外基質（ECM）在細胞外的大量聚積為特征，其主要包括腎小球硬化和小管間質纖維化,它是各種慢性腎臟?。–KD）向終末期進展過程中的一種共同病理表現。CKD的發(fā)病率在全球范圍內隨著衰老人群以及糖尿病、肥胖和高血壓病患病人數的增加而進一步升高。近年來，眾多研究表明腎纖維化與CKD的進展密切相關。腎纖維化的發(fā)生發(fā)展是一個復雜的病理過程，是多方面因素的共同作用、多種細胞因子共同參與的結果。了解腎臟纖維化的發(fā)生機制，

2、將有助于抗纖維化的治療，延緩CKD進展，極大減少終末期腎病的發(fā)生率及其并發(fā)癥，減輕其所造成的社會經濟負擔?？鼓I臟纖維化治療近年來才引起重視，大多數治療尚處于實驗研究階段。已證實,上皮細胞轉分化為成纖維細胞或肌成纖維細胞（EMT）,是腎纖維化發(fā)生的重要機制，轉化生長因子-β1（TGF-β1）是最強烈的致纖維化因子。腎小球的足細胞、壁層上皮細胞及腎小管的上皮細胞均可發(fā)生EMT。整合素鏈激酶（ILK）被認為是控制腎小管上皮細胞EMT的關鍵細胞

3、內調節(jié)劑，此外，已有研究證明ILK的上調是通過一個匯聚路徑導致足細胞EMT、轉移和功能失調。目前的研究證明，在SW480結腸癌細胞系中有胸腺肽β4基因的過度表達并伴隨著成纖維細胞形態(tài)的改變和細胞間的連接變得疏松；同時伴隨著E-鈣粘素（E－cadherin）表達明顯下降。E－cadherin是上皮細胞表型標志蛋白，α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)是肌成纖維細胞的主要標記物，E－cadherin的丟失和α-SMA的表達上調被認為是EMT的主要

4、標志。胸腺肽β4（Tβ4）是一種具有抗炎、促血管生成和傷口愈合作用的四肽，最近研究發(fā)現它在發(fā)生EMT的細胞中及硬化的腎小球中的表達是增加的，Tβ4可能通過介導ILK的上調而起到致纖維化的作用，但其降解產物氮乙酰絲氨酰天冬氨酰賴氨酰脯氨酸（Ac-SDKP）具有抗纖維化的作用，這說明 Tβ4和Ac-SDKP之間的平衡調節(jié)著腎纖維化的進展。
　　目的：
　　研究Tβ4在腎小管上皮細胞EMT后的表達變化和其與Ac-SDKP之間的關系

5、，進一步揭示腎纖維化的發(fā)生機制，為抗纖維化的藥物研究提供新方向，延緩CKD進展至慢性腎衰竭。
　　方法：
　　選擇我院44例病理學證實為慢性腎盂腎炎、FSGS、腎炎伴間質纖維化、輕微病變的患者作為病例組，8例正常健康人為對照組，用ELISA試劑盒檢測尿液中Tβ4的含量；另選擇8例因外傷進行腎切除患者的正常腎組織作為正常對照，通過腎組織免疫組化染色的方法檢測腎組織中α-SMA和Tβ4的表達；再用TGF-β1刺激體外大鼠的腎小管

6、上皮細胞誘導轉分化為肌成纖維細胞，及予Ac-SDKP進行干預后，通過細胞免疫組化的方法檢測細胞α-SMA和Tβ4表達情況的變化，探討Tβ4在EMT的作用及與Ac-SDKP的關系。結合臨床資料、尿腎臟功能的測定,用SPSS軟件系統(tǒng)進行統(tǒng)計學分析。
　　結果：
　　ELISA結果顯示，病例組患者尿液中 Tβ4的含量是高于正常對照組，尤其是慢性腎盂腎炎組。免疫組化結果示病例組與對照組相比，α-SMA和Tβ4的表達明顯增加，兩組間差

7、異有顯著性，且染色深淺與纖維化程度成正比；細胞免疫組化結果顯示，與空白對照組相比，TGF-β1刺激組α-SMA和Tβ4的表達顯著增加，但Ac-SDKP干預組，α-SMA和Tβ4的表達下降，且對Ac-SDKP有濃度依賴性，濃度越高，下降越明顯，各組間差異有統(tǒng)計學意義。
　　結論：
　　Tβ4在硬化的腎小球、纖維化的腎小管、腎間質纖維化區(qū)域及成纖維細胞中的表達是增加的，說明 Tβ4有致纖維化可能；在發(fā)生 EMT的腎小管上皮細胞內