急性低氧對(duì)大鼠胃組織細(xì)胞端粒長(zhǎng)度的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過檢測(cè)急性低氧環(huán)境下大鼠胃組織細(xì)胞端粒長(zhǎng)度及 TERT（端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶， Telomerase reverse transcriptase）、HIF-1a（低氧誘導(dǎo)因子1α， Hypoxia-inducible factor1α）、HIF-2a（低氧誘導(dǎo)因子2α，Hypoxia-inducible factor2α）、ROS（活性氧自由基，reactive oxygen species）表達(dá)水平，觀察急性低氧環(huán)境下大鼠胃組織細(xì)胞

2、端粒長(zhǎng)度的變化，并探討其具體機(jī)制。
　　方法：①選擇雄性Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為對(duì)照組(n=10，蘭州，1500米)與實(shí)驗(yàn)組(n=30，低壓氧艙，5000米)，實(shí)驗(yàn)組根據(jù)低氧暴露時(shí)間不同，分為低氧1d、3d、7d三組，每組各10只，取各組大鼠胃組織，行HE染色并在顯微鏡下觀察胃組織細(xì)胞大體形態(tài)結(jié)構(gòu)變化；②提取各組大鼠胃組織細(xì)胞DNA，采用Real-time PCR法測(cè)其端粒長(zhǎng)度；③提取各組大鼠胃組織細(xì)胞總RNA及蛋白，采用

3、Real-time PCR及Elisa法分別測(cè)其TERT、HIF-1α及HIF-2αmRNA及蛋白表達(dá)水平；④制備各組大鼠胃組織勻漿液，采用化學(xué)熒光法測(cè)其ROS水平；⑤分析各組大鼠胃組織細(xì)胞TERT、HIF-1α、HIF-2α及ROS水平在其端粒長(zhǎng)度變化中的作用，并行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：①在低壓氧艙中模擬5000m高海拔（嚴(yán)重低氧環(huán)境）構(gòu)建出高原嚴(yán)重低氧對(duì)大鼠胃組織細(xì)胞的損傷模型，其病理結(jié)果顯示隨著低氧時(shí)間的逐漸延長(zhǎng)，胃黏膜損

4、傷逐漸加重，主要表現(xiàn)為胃黏膜腺體逐漸萎縮，黏膜充血，大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)胞發(fā)生嗜酸性變；②與對(duì)照組相比，各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組端粒長(zhǎng)度均延長(zhǎng)（P＜0.05），并且隨著低氧時(shí)間的延長(zhǎng)，端粒長(zhǎng)度表現(xiàn)為逐漸增加的趨勢(shì)；③各組TERT、HIF-1αmRNA及蛋白表達(dá)水平的變化趨勢(shì)與其端粒長(zhǎng)度的變化趨勢(shì)基本一致，但其HIF-2αmRNA及蛋白表達(dá)水平未見這一變化趨勢(shì)，僅在低氧7天組表達(dá)增加；④實(shí)驗(yàn)組ROS表達(dá)量與對(duì)照組相比均增加（P＜0.05），并且隨著低

5、氧時(shí)間的延長(zhǎng)，ROS表達(dá)量逐漸升高；⑤大鼠胃組織細(xì)胞中TERT與HIF-1α的蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)（r=0.839 P＜0.05），而TERT與HIF-2α蛋白表達(dá)水平無相關(guān)性（r=0.298 p=0.062）；⑥大鼠胃組織細(xì)胞中TERT與HIF-1αmRNA表達(dá)水平呈正相關(guān)（r=0.904 P＜0.05）；TERT mRNA表達(dá)水平與端粒長(zhǎng)度呈正相關(guān)（r=0.962 P＜0.05），而 TERT與 HIF-2α mRNA表達(dá)無相關(guān)性（

6、r=0.298 p=0.248）。
　　結(jié)論：①急性嚴(yán)重高原低氧環(huán)境可使機(jī)體ROS表達(dá)增加，進(jìn)而導(dǎo)致大鼠胃組織細(xì)胞損傷；②急性嚴(yán)重高原低氧環(huán)境可誘導(dǎo)大鼠胃組織細(xì)胞端粒延長(zhǎng)，并且端粒的長(zhǎng)度隨著低氧時(shí)間的延長(zhǎng)而延長(zhǎng)，且與TERT與HIF-1α表達(dá)呈正相關(guān)，而與 HIF-2α表達(dá)無明顯相關(guān)，由此考慮急性高原嚴(yán)重低氧引起端粒延長(zhǎng)的機(jī)制為：大鼠胃組織細(xì)胞HIF-1α表達(dá)水平升高，誘導(dǎo)TERT表達(dá)及端粒酶活性增加，來延長(zhǎng)端粒；③急性嚴(yán)重高原低