花背蟾蜍胎肺發(fā)育中相關(guān)活性物質(zhì)的表達(dá)及其調(diào)控意義.pdf

1、本文以花背蟾蜍蝌蚪為對(duì)象，利用生物顯微技術(shù)研究了花背蟾蜍蝌蚪肺的發(fā)生；采用免疫組織化學(xué)方法研究了表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子B(TGF-β<,1>，TGF-β<,2>，TGF-β<,3>)在花背蟾蜍蝌蚪肺發(fā)育過程中的表達(dá)情況，利用美國(guó)Image-pro plus5.0專業(yè)圖像分析軟件對(duì)表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子B(TGF-β<,1>，TGF-β<,2>，TGF-β<,3>)的表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行定量分析。

2、1．花背蟾蜍的肺開始發(fā)生在幼蟲時(shí)期的第21期，它起始于咽部后側(cè)，向腹側(cè)突起形成肺芽，肺芽經(jīng)22、23、24期的緩慢發(fā)育，直到25期才開始分化出現(xiàn)微小的肺囊，但是里面充滿液體，到30期開始形成明顯的肺囊，且肺囊中已有氣體，33期開始出現(xiàn)肺泡，36期時(shí)肺壁已充分伸展，肺泡增多，肺壁變薄，典型的氣．血屏障開始形成，37期肺壁內(nèi)表面的網(wǎng)狀隔膜明顯，到38期時(shí)肺壁進(jìn)一步變薄，39期肺已接近幼蟾肺，成年花背蟾蜍的肺成囊狀，并且在肺的內(nèi)壁上有許多網(wǎng)狀

3、隔膜，將肺的內(nèi)壁分隔形成許多小室，在每個(gè)小室內(nèi)又有少數(shù)次級(jí)皺褶將小室分隔為數(shù)個(gè)近似半球形或“C”形小腔，肺內(nèi)表面覆蓋有一層肺上皮細(xì)胞。 2．花背蟾蜍胎肺發(fā)育的早期，EGFR主要表達(dá)于肺網(wǎng)狀隔膜的上皮細(xì)胞，且較集中于上皮細(xì)胞的游離表面；37-39期，EGFR在肺泡囊及肺泡上皮細(xì)胞的陽性表達(dá)最活躍，EGFR在間充質(zhì)細(xì)胞區(qū)域性分布更加明顯；幼蟾期，EGFR陽性反應(yīng)主要定位在肺泡上皮細(xì)胞，在肺網(wǎng)狀隔膜處幾乎不表達(dá)。 EGFR表達(dá)

4、變化的定量分析顯示在花背蟾蜍胎肺發(fā)育的全過程中，EGFR的表達(dá)水平呈逐漸上升狀態(tài)，在30-35期變化比較平穩(wěn)，至37期達(dá)到峰值，繼而逐漸下降，39期和幼蟾期的表達(dá)水平又有所回升。 3．TGF-β<,1>，TGF-β<,2>，TGF-β<,3>三者均定位于細(xì)胞漿，陽性表達(dá)區(qū)域基本一致。30-36期，TGF-β在肺網(wǎng)狀隔膜處和間充質(zhì)細(xì)胞均呈現(xiàn)弱陽性，并且在網(wǎng)狀隔膜處呈區(qū)域性分布特點(diǎn)；37-39期，TGF-β在肺網(wǎng)狀隔膜處表達(dá)變?nèi)?，?/p>

5、平滑肌和肺間質(zhì)細(xì)胞TGF-β呈強(qiáng)陽性表達(dá)：幼蟾期，血管周圍的平滑肌和肺間質(zhì)細(xì)胞處呈陽性表達(dá)。 TGF-β表達(dá)變化的定量分析顯示在花背蟾蜍肺發(fā)育的全過程中，TGF-β(β<,1>，β<,2>，β<,3>)的表達(dá)呈間歇性變化，表明TGF-β在不同的生長(zhǎng)時(shí)期，在肺組織中的表達(dá)均不同。 4．在花背蟾蜍胎肺發(fā)育的不同時(shí)期，EGFR，TGF-β<,1>，TGF-β<,2>，TGF-β<,3>因子在肺網(wǎng)狀隔膜處和肺泡上皮細(xì)胞處的表達(dá)定