雞腎發(fā)生的組織學(xué)觀察及相關(guān)活性物質(zhì)的表達(dá)與調(diào)控.pdf

1、目的：通過觀察9個(gè)不同發(fā)育時(shí)期雞（Gallus domestiaus）胚胎腎組織的發(fā)生過程和5 只紅腹錦雞的腎組織，檢測表皮生長因子受體(EGFR)、轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β）、水通道蛋白2（AQP-2）和Bax 蛋白在雞胚腎（小管）發(fā)生過程和紅腹錦雞腎組織中的表達(dá)，探討鳥類中腎的發(fā)生與退化，后腎發(fā)生及分化的規(guī)律和特點(diǎn)，同時(shí)了解紅腹錦雞腎的結(jié)構(gòu)特征，并研究各種蛋白的生物活性作用及相互之間的調(diào)控意義。
　　 方法：采用組織學(xué)方法

2、和電鏡技術(shù)觀察不同發(fā)育時(shí)期雞胚胎腎組織的發(fā)生過程及紅腹錦雞（Chrysolophus pictus）腎的結(jié)構(gòu)，應(yīng)用免疫組織化學(xué)和體視學(xué)半定量檢測EGFR、TGF-β（β1、β2、β3）、AQP-2 及Bax 蛋白在雞胚腎（小管）發(fā)生過程和紅腹錦雞腎中的表達(dá)，用IPP 專業(yè)圖像分析軟件，對(duì)其表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行定量分析。
　　 結(jié)果：(1)雞胚孵育到第16 期在中腎前端附近出現(xiàn)一些中腎小泡。孵育到第18 期形成中腎小管。孵育到第26 期，

3、中腎小管的盲端內(nèi)陷，原始的腎小囊和腎血管球形成，中腎小管顯著伸長并迂回曲折。孵育到第33～37 期體前后部中腎組織均已形成完整的腎單位。第37～46 期體前部至后部的中腎組織依次退化。孵育到第26期從泄殖腔附近發(fā)出的輸尿管芽向生后腎組織侵入生長，生后腎組織產(chǎn)生許多生后腎小泡。第33 期出現(xiàn)腎小囊和腎小管，腎小管伸長并發(fā)生折疊，出現(xiàn)集合小管、近端小管和遠(yuǎn)端小管的形態(tài)分化。第37～46 期腎小體逐漸發(fā)育成熟，腎小管繼續(xù)分化出現(xiàn)細(xì)段。(2)第

4、26～46 期雞胚腎的近端小管上皮細(xì)胞呈EGFR 免疫反應(yīng)陽性；第26～37 期中腎的近端小管上皮細(xì)胞和遠(yuǎn)端小管上皮細(xì)胞呈TGF-β免疫反應(yīng)陽性，第33～40 期后腎的近端小管上皮細(xì)胞和遠(yuǎn)端小管上皮細(xì)胞呈TGF-β免疫反應(yīng)陽性，第44～46 期近端小管上皮細(xì)胞呈TGF-β免疫反應(yīng)陽性，遠(yuǎn)端小管上皮細(xì)胞呈TGF-β免疫反應(yīng)陰性；第26～46 期雞胚腎的集合小管上皮細(xì)胞呈AQP-2 免疫反應(yīng)陽性；第26～37 期中腎近端小管和遠(yuǎn)端小管上皮細(xì)

5、胞呈Bax 反應(yīng)陽性，第33～46期后腎近端小管上皮細(xì)胞呈Bax 免疫反應(yīng)陽性。圖像分析顯示，在雞胚腎發(fā)生過程中EGFR，TGF-β（β1，β2，β3）和Bax 蛋白的陽性反應(yīng)呈現(xiàn)先增強(qiáng)后減弱的變化，AQP-2 陽性反應(yīng)呈持續(xù)增強(qiáng)的趨勢。(3)紅腹錦雞腎主要由許多腎單位、集合管和少量結(jié)締組織組成。腎單位是腎功能結(jié)構(gòu)的基本單位，它由一個(gè)腎小體和一個(gè)與其連接的上皮性腎小管構(gòu)成。血管球由一團(tuán)迂回盤曲的毛細(xì)血管叢構(gòu)成，結(jié)構(gòu)簡單；腎小囊足細(xì)胞的突

6、起與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及基膜緊密相貼，三者構(gòu)成腎小體的濾過屏障；近端小管由單層立方上皮組成，上皮細(xì)胞游離面有許多微絨毛，細(xì)胞界限不明顯，側(cè)面有許多指狀突起彼此交錯(cuò)，質(zhì)膜內(nèi)褶較少；遠(yuǎn)端小管上皮細(xì)胞基底面有豐富的質(zhì)膜內(nèi)褶；集合管上皮細(xì)胞有明細(xì)胞和暗細(xì)胞兩種類型；近端小管上皮細(xì)胞呈EGFR、TGF-β免疫反應(yīng)陽性，集合管上皮細(xì)胞呈AQP-2 免疫反應(yīng)陽性。
　　 結(jié)論：(1)雞的中腎具有排泄功能。雞后腎的發(fā)生與分化存在明顯的時(shí)間差異。腎

7、單位的分化中，同一胚齡腎組織內(nèi)可存在不同發(fā)育階段的腎小體，集合小管分化較早，誘導(dǎo)近端小管和遠(yuǎn)端小管分化，細(xì)段分化較遲。(2)中腎腎小管的退化可能與TGF-β和Bax 蛋白的大量表達(dá)有關(guān)。EGFR、TGF-β、AQP-2和Bax 蛋白的協(xié)同表達(dá)調(diào)控著后腎腎小管和集合小管的發(fā)生及分化成熟。在腎發(fā)育過程中集合小管上皮細(xì)胞AQP-2 表達(dá)豐富，AQP-2 可能介導(dǎo)胚胎發(fā)育過程中水平衡的穩(wěn)定。EGFR、TGF-β和AQP-2、Bax 蛋白在胚胎腎

8、不同發(fā)育階段具有不同的表達(dá)規(guī)律和特征，發(fā)揮著不同的功能，它們對(duì)腎單位的構(gòu)筑、腎小管和集合小管上皮的成熟分化都有重要的調(diào)節(jié)作用。(3)EGFR、TGF-β、AQP-2 可能發(fā)揮著不同的功能，對(duì)紅腹錦雞腎的腎單位、腎小管和集合管結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定以及腎水的平衡等可能有重要的調(diào)節(jié)作用。(4)雞和紅腹錦雞腎結(jié)構(gòu)和功能基本相似。紅腹錦雞腎的近端小管細(xì)胞頂部有許多電子密度高的短棒狀致密顆粒，底部細(xì)胞質(zhì)被深染，集合管細(xì)胞頂部胞質(zhì)中亦有較多具有分泌功能的囊泡。