進(jìn)行性肌營養(yǎng)不良的臨床病理分析及炎癥機(jī)制的初步探討.pdf

1、目的:進(jìn)行性肌營養(yǎng)不良(progressive muscular dystrophy，PMD)是一組遺傳性肌肉變性疾病，主要表現(xiàn)為緩慢進(jìn)行性加重的肌無力、萎縮，累及肢體和頭面部肌肉，少數(shù)可累及呼吸肌、心肌。血清肌酶可見不同程度增高;肌電圖多呈肌源性損害;肌肉病理表現(xiàn)為肌纖維大小不等、變性、壞死和再生，部分可有炎細(xì)胞浸潤(rùn)。目前尚無有效的治療方法。
　　目前大量的研究表明機(jī)械損傷、炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、自噬、纖維化、凋亡等機(jī)制參與PMD

2、的病理生理過程，但其具體機(jī)制至今仍不清楚。
　　由于PMD的臨床表現(xiàn)和常規(guī)肌肉病理缺乏特征性，部分病理可見炎細(xì)胞浸潤(rùn)，與特發(fā)性炎癥性肌病(idiopathic inflammatory myopathy，IIM)十分相似，極易誤診，并給予不恰當(dāng)?shù)闹委煛?br>　　本研究利用免疫組織化學(xué)染色(immunohistochemical staining，IHC)方法檢測(cè)dystrophinopathy和dysferlinopathy患者

3、肌肉組織中浸潤(rùn)炎細(xì)胞的類型、分布及MHC-Ⅰ表達(dá)情況，總結(jié)臨床和病理特點(diǎn)，初步探討其炎癥機(jī)制。以期為日后更準(zhǔn)確地診斷及鑒別診斷提供依據(jù)，并為尋求有效的治療方案奠定基礎(chǔ)，也對(duì)疾病的治療、判斷預(yù)后有指導(dǎo)作用。
　　方法:收集2012年至2014年就診于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，結(jié)合臨床和病理診斷為PMD的患者的肌肉標(biāo)本36例，行常規(guī)肌肉病理染色，光鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變;行肌營養(yǎng)不良相關(guān)抗體的IHC分型診斷。
　　選取臨床資料保存完整，

4、診斷為dystrophinopathy和dysferlinopathy的肌肉標(biāo)本作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，其中dystrophinopathy（DMD/BMD組）8例，dysferlinopathy（DYSF組）5例，總結(jié)其臨床特征。選取診斷為IIM和肌肉病理檢查正常的肌肉標(biāo)本22例作為對(duì)照，包括多發(fā)性肌炎（PM組）7例、皮肌炎（DM組）7例，正常對(duì)照（CO組）8例。各組肌肉標(biāo)本同時(shí)用抗CD4/8/20/68蛋白和抗MHC-Ⅰ5種單克隆抗體進(jìn)行IH

5、C，光鏡下觀察浸潤(rùn)炎細(xì)胞的類型、分布特點(diǎn)及MHC-Ⅰ的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1、36例PMD患者的常規(guī)病理結(jié)果
　　光鏡下，HE染色顯示肌束衣和肌內(nèi)衣結(jié)締組織和脂肪組織輕度或明顯增生，血管結(jié)構(gòu)基本正常。多數(shù)肌纖維排列疏松，大小不等，均可見萎縮肌纖維，多數(shù)可見肥大肌纖維，基本呈圓形外觀。部分可見不同程度的變性、壞死和吞噬，也可見肌再生、肌分裂和核內(nèi)移，偶見鑲邊空泡。6例可見散在炎細(xì)胞浸潤(rùn)，主要位于肌間和血管周圍。M

6、GT染色僅5例可見不典型不整邊紅纖維。NADH和SDH染色均可見不同程度的肌纖維內(nèi)氧化酶分布不均。NSE染色多數(shù)可見深染肌纖維。ACP染色顯示少數(shù)可見小片狀輕度酶活性增高。ORO和PAS染色多數(shù)可見不同程度的糖脂增多。ATP酶染色可見多數(shù)兩型肌纖維基本呈鑲嵌排列，大部分萎縮累及兩型。
　　2、36例PMD患者肌營養(yǎng)不良相關(guān)抗體IHC結(jié)果
　　Dystrophin蛋白缺陷（完全或部分缺失）者14例;dysferlin蛋白缺陷者

7、11例;α/β/γ/δ-sarcoglycan4種蛋白至少有一種缺陷者9例。
　　3、Dystrophinopathy和dysferlinopathy患者的臨床資料
　　PMD臨床分型眾多，其中部分dystrophinopathy和dysferlinopathy肌肉病理可見炎細(xì)胞浸潤(rùn)，有時(shí)與IIM難以鑒別，僅總結(jié)以上兩類的臨床資料。
　　3.1 Dystrophinopathy
　　結(jié)合臨床、病理結(jié)果診斷為dys

8、trophinopathy者8例，其中DMD3例，BMD5例，均為男性，僅1例有家族史;平均發(fā)病年齡12.81歲;病程3個(gè)月～5年。6例以雙下肢無力起病;1例以發(fā)現(xiàn)肌酶升高來診，無明顯肢體無力表現(xiàn);1例以心慌胸悶首診于心內(nèi)科。7例查體可見肌肉無力表現(xiàn)，3例可見四肢近端肌肉萎縮，5例伴腓腸肌肥大。8例均可見血清肌酸激酶升高。6例肌電圖提示肌源性損害，1例為混合性損害，1例未見明顯異常。2例心電圖和/或超聲心動(dòng)圖異常。2例患者既往于外院曾考

9、慮為“肌炎”，給予激素治療。
　　3.2 Dysferlinopathy
　　結(jié)合臨床、病理，5例符合dysferlinopathy診斷，男性3例，女性2例，均無明確家族史;平均發(fā)病年齡23歲，病程4.02年。4例以肌肉無力為主訴，1例以發(fā)現(xiàn)肌酶升高來診。2例可見肌肉萎縮和肥大。5例血清肌酸激酶均可見升高;肌電圖均提示肌源性損害。3例曾于外院行肌肉活檢，診斷為“肌炎”，給予激素和/或免疫抑制劑治療。
　　4、炎細(xì)胞及M

10、HC-Ⅰ的IHC結(jié)果
　　4.1正常對(duì)照
　　在CO組中，僅肌束膜、肌內(nèi)膜的血管內(nèi)可見炎細(xì)胞著色;僅血管內(nèi)皮細(xì)胞可見MHC-Ⅰ表達(dá)。
　　4.2 Dystrophinopathy和Dys ferlinopathy
　　在DMD/BMD組和DYSF組中，浸潤(rùn)的炎細(xì)胞呈散在或小灶性分布，主要位于間質(zhì)組織，血管及變性、壞死、萎縮肌纖維周圍區(qū)域;主要為巨噬細(xì)胞，CD4+T細(xì)胞較CD8+T細(xì)胞多見，未見明顯B細(xì)胞浸潤(rùn)。

11、r>　　兩組均可見MHC-Ⅰ表達(dá)輕度上調(diào)(±～+)，主要為伴炎細(xì)胞浸潤(rùn)區(qū)域的變性、壞死及萎縮肌纖維。
　　4.3 IIM
　　PM組和DM組均可見炎細(xì)胞浸潤(rùn)。在PM組中，炎細(xì)胞多位于肌間及壞死肌纖維周圍，可見炎細(xì)胞圍繞和浸潤(rùn)非壞死肌纖維;多為巨噬細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞，CD4+T細(xì)胞少見，幾乎未見B細(xì)胞浸潤(rùn)。在DM組中，炎細(xì)胞多位于束周萎縮區(qū)域、肌束膜及血管周圍區(qū)域，主要為CD4+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞，CD8+T細(xì)胞較少。

12、
　　兩組中所有肌纖維膜上均可見MHC-Ⅰ表達(dá)(++～+++)，部分肌纖維胞漿內(nèi)及浸潤(rùn)的炎細(xì)胞也可見MHC-Ⅰ表達(dá)上調(diào)。
　　結(jié)論:
　　1、PMD患者的臨床表現(xiàn)和常規(guī)肌肉病理缺乏特異性，僅依據(jù)臨床和常規(guī)肌肉病理進(jìn)行診斷存在局限性，需進(jìn)一步行IHC。
　　2、利用肌營養(yǎng)不良相關(guān)抗體對(duì)擬診PMD的肌肉標(biāo)本行IHC可進(jìn)一步明確診斷并分型，指導(dǎo)基因檢測(cè)，也為疾病的治療、判斷預(yù)后提供幫助。
　　3、炎癥反應(yīng)參與了d