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文檔簡介
1、糞腸球菌以往被認為是人類及動物的共生菌,但近十幾年來,其引起人和動物發(fā)生感染性疾病的報道越來越多,這主要是與其耐藥性和毒力增強有一定的關聯。為了解和評估該地區(qū)糞腸球菌對人和豬養(yǎng)殖業(yè)的潛在威脅,本研究通過選擇性培養(yǎng)基、PCR技術分離鑒定糞腸球菌,再對分離株進行藥敏試驗,最后采用PCR技術檢測糞腸球菌的相關耐藥基因及毒力基因,結果如下:
2014年至2015年間從江西省7個不同地區(qū)部分豬場采集349份新鮮豬糞樣,其中197份腹瀉糞
2、樣和152份正常糞樣。經兩重選擇性培養(yǎng)篩選和特異性PCR擴增確定,共分離并鑒定出226株糞腸球菌,分離率為64.8%,其中腹瀉糞便糞腸球菌分離率(72.6%)高于正常糞便分離率(54.6%)。各地區(qū)中九江地區(qū)采集的樣本分離率最高(82.2%),宜春地區(qū)次之(80.4%),撫州地區(qū)分離率最低(35.9%),且各地區(qū)分離率總的來說差異顯著。
采用紙片擴散法對226株豬源糞腸球菌進行7種抗菌藥物藥敏試驗。試驗結果顯示,江西省豬源糞腸
3、球菌分離株多重耐藥性嚴重,多重耐藥分離株有117株(78.32%);其中分離株對紅霉素和多西環(huán)素耐藥率較高,分別為97.35%和92.48%,對環(huán)丙沙星和氟苯尼考耐藥率相對較低,分別為65.04%和61.95%,統(tǒng)計發(fā)現,糞腸球菌分離株對多西環(huán)素的耐藥率存在顯著性差異;本研究僅在贛州地區(qū)發(fā)現3株對氨芐西林耐藥的菌株;未發(fā)現對萬古霉素或替考拉寧耐藥菌株。226株糞腸球菌分離株有14種耐藥表型,其中以紅霉素+環(huán)丙沙星+多西環(huán)素+氟苯尼考耐藥
4、表型在分離株中比較流行。
通過PCR方法對226株糞腸球菌分離株進行氟苯尼考耐藥基因檢測。試驗結果顯示,豬源糞腸球菌中攜帶fexA158株(69.91%)、cfr13株(5.75%)和fexB10株(4.42%)。在本試驗中表型對氟苯尼考耐藥的菌株均檢出了耐藥基因,而有22株攜帶耐藥基因的菌株未表現出對氟苯尼考的耐藥;江西省豬源糞腸球菌分離株對氟苯尼考耐藥的機制主要是fexA基因介導的特異性外排機制。
運用PCR方法
5、對226株糞腸球菌進行6種毒力基因檢測,試驗結果顯示,98.23%的糞腸球菌至少攜帶一種毒力基因,各基因檢出率由高到低依次為efaA、ace、gelE、agg、 esp和clyA。有170株(75.22%)分離株攜帶3~5種毒力基因;共檢出25種不同毒力基因型,攜帶gelE+ace+ efaA基因型的分離株在江西省較流行。對226株糞腸球菌分離株進行β溶血和明膠溶解表型檢測,發(fā)現相應的基因型和表現型存在不完全一致的現象。糞腸球菌分離株所
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