磁共振灌注成像ASL與DSC法在評價膠質(zhì)瘤級別、微血管密度和Ki-67標(biāo)記指數(shù)中的應(yīng)用研究.pdf

1、目的：
　　腦膠質(zhì)瘤為成人最常見的顱內(nèi)原發(fā)性惡性腫瘤，其惡性程度高、侵襲性強(qiáng)、術(shù)后易復(fù)發(fā)。不同級別膠質(zhì)瘤的臨床病程和治療手段與腫瘤級別密切相關(guān)。腫瘤的快速生長依賴于充足的血液供應(yīng)，從而導(dǎo)致了新生血管生成。腫瘤新生血管生成是判斷星型細(xì)胞瘤生物學(xué)侵襲性的最重要因素。目前，多數(shù)研究通過查數(shù)血管數(shù)量或微血管密度（microvessel density，MVD）來評價膠質(zhì)瘤新生血管生成程度。惡性腫瘤的腫瘤細(xì)胞常具有較高的增殖潛力，腫瘤細(xì)胞的

2、增殖潛力是影響腫瘤預(yù)后的重要因素。Ki-67標(biāo)記指數(shù)(ki-67 labeling index，Ki-67 LI)是反映腫瘤細(xì)胞增殖潛力的最可靠生物學(xué)標(biāo)記物。因此，術(shù)前準(zhǔn)確的評價膠質(zhì)瘤級別、微血管密度和Ki-67標(biāo)記指數(shù)對臨床上治療方案的選擇、腫瘤預(yù)后的評價具有非常重要的意義。
　　動態(tài)磁敏感對比增強(qiáng)(dynamic susceptibility contrast-enhanced imaging，DSC)是臨床上最主要的磁共振灌

3、注方法，已有多數(shù)研究表明DSC有助于評價膠質(zhì)瘤級別、微血管密度。動脈自旋標(biāo)記技術(shù)(arterial spin labeling，ASL)是一項(xiàng)新穎的磁共振灌注方法，它不使用對比劑，以磁化標(biāo)記的動脈血作為內(nèi)源性標(biāo)記物。目前，ASL技術(shù)在膠質(zhì)瘤中的應(yīng)用仍主要處于初步臨床和實(shí)驗(yàn)研究階段，相關(guān)報道不多。本研究旨在探討磁共振灌注成像ASL與DSC法在評價膠質(zhì)瘤級別、微血管密度和Ki-67標(biāo)記指數(shù)中的應(yīng)用價值。
　　方法：
　　收集20

4、12年12月至2014年9月間本院原發(fā)膠質(zhì)瘤病例38例。所有病例均首次診斷為膠質(zhì)瘤;入組前未接受手術(shù)及放化療等治療;術(shù)前一周完成顱腦常規(guī)MRI及磁共振灌注成像ASL、DSC檢查，術(shù)后經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)為膠質(zhì)瘤。膠質(zhì)瘤的組織病理學(xué)分級依據(jù)世界衛(wèi)生組織2007年中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類方法。所有患者均簽署了知情同意書。磁共振灌注成像ASL法采用脈沖式動脈自旋標(biāo)記(pulsed arterial spin labeling，PASL)技術(shù)。 DSC

5、法采用單次激發(fā)梯度回波-平面回波序列(GRE-EPI)序列。將采集的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入Siemens后處理工作站，用Perfusion軟件包處理獲得DSC法的腦血流量(cerebral blood f low, CBF)圖、腦血容量(cerebral blood volume，CBV)圖。用隨機(jī)軟件處理獲得ASL法的CBF圖。觀測所得各組灌注圖，并結(jié)合常規(guī)MR平掃及增強(qiáng)掃描圖像，避開腫瘤內(nèi)出血、壞死囊變區(qū)，選取腫瘤實(shí)性部分最大血流灌注區(qū)設(shè)置感

6、興趣區(qū)，同時取同層面對側(cè)灰質(zhì)作為對照，并測量相應(yīng)的CBF、CBV值。每個感興趣區(qū)測量3次，求平均值，然后分別計(jì)算其比值，得出標(biāo)準(zhǔn)的灌注參數(shù)如:相對腦血容量(relative cerebral bloodvolume，rCBV)，相對腦血流量(relative cerebral blood f low, rCBF)。
　　Ki-67檢測用Ki-67抗原的單克隆抗體MIB-1(Dako S.A.，Glostrup，Denmark)對膠

7、質(zhì)瘤組織切片進(jìn)行免疫組化染色。染色后的膠質(zhì)瘤組織切片由兩名有經(jīng)驗(yàn)的神經(jīng)病理學(xué)醫(yī)師評價。凡是細(xì)胞核著色的膠質(zhì)瘤細(xì)胞均被認(rèn)為是陽性，Ki-67標(biāo)記指數(shù)(ki-67 labeling index，Ki-67 LI)認(rèn)定為陽性細(xì)胞占所有查數(shù)細(xì)胞的百分比。MVD檢測用血管內(nèi)皮細(xì)胞特定的CD34抗原的單克隆抗體clone QBEND/10(BioGenex，San Ramon，Calif)對腫瘤組織切片進(jìn)行免疫組化染色。數(shù)字圖像由顯微鏡(BX51;

8、Olympus)和數(shù)字照相機(jī)(DP50-CU; Olympus)獲得，一個放大400倍的高倍鏡視野用于生成光學(xué)放大圖像。在每一個樣本上選擇3個獨(dú)立的區(qū)域，查數(shù)并記錄每一個高倍鏡視野下的MVD值并計(jì)算平均值。MVD的查數(shù)方法依照Weidner[24]法。應(yīng)用SPSS17.0軟件包，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±s)表示。首先對膠質(zhì)瘤各灌注參數(shù)值進(jìn)行正態(tài)分布及方差齊性檢驗(yàn)(Welch test)。膠質(zhì)瘤的ASL、DSC各灌注參數(shù)與組織病理

9、學(xué)參數(shù)間的相關(guān)關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　所有用于組織病理學(xué)分析的膠質(zhì)瘤組織均經(jīng)手術(shù)獲得，并最終診斷為膠質(zhì)瘤，其中包括膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（Ⅳ級）15例，間變性星形細(xì)胞瘤（Ⅲ級）7例，間變性少突星形細(xì)胞瘤（Ⅲ級）3例，星形細(xì)胞瘤（Ⅱ級）9例，彌漫性星形細(xì)胞瘤（Ⅱ級）2例，少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤（Ⅱ級）2例。膠質(zhì)瘤T1WI上多呈低信號，T2WI上呈高信號，腫瘤周圍常伴有長T1長T2信號水腫

10、影。增強(qiáng)掃描后低級別膠質(zhì)瘤無強(qiáng)化或僅見輕度強(qiáng)化，高級別膠質(zhì)瘤則呈明顯強(qiáng)化，腫瘤內(nèi)常見斑片狀無強(qiáng)化的囊變壞死區(qū)。在ASL、DSC灌注圖上低級別膠質(zhì)瘤多呈低灌注，高級別膠質(zhì)瘤多呈高灌注。高級別膠質(zhì)瘤ASL-CBF、DSC-rCBV、DSC-rCBF值均明顯高于低級別膠質(zhì)瘤，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05。在膠質(zhì)瘤ASL、DSC各灌注參數(shù)值與MVD、Ki-67 LI的Pearson相關(guān)性分析中DSC-rCBF, DSC-rCBV, ASL-rCB