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1、目的:
腦膠質(zhì)瘤為成人最常見的顱內(nèi)原發(fā)性惡性腫瘤,其惡性程度高、侵襲性強(qiáng)、術(shù)后易復(fù)發(fā)。不同級(jí)別膠質(zhì)瘤的臨床病程和治療手段與腫瘤級(jí)別密切相關(guān)。腫瘤的快速生長(zhǎng)依賴于充足的血液供應(yīng),從而導(dǎo)致了新生血管生成。腫瘤新生血管生成是判斷星型細(xì)胞瘤生物學(xué)侵襲性的最重要因素。目前,多數(shù)研究通過查數(shù)血管數(shù)量或微血管密度(microvessel density,MVD)來評(píng)價(jià)膠質(zhì)瘤新生血管生成程度。惡性腫瘤的腫瘤細(xì)胞常具有較高的增殖潛力,腫瘤細(xì)胞的
2、增殖潛力是影響腫瘤預(yù)后的重要因素。Ki-67標(biāo)記指數(shù)(ki-67 labeling index,Ki-67 LI)是反映腫瘤細(xì)胞增殖潛力的最可靠生物學(xué)標(biāo)記物。因此,術(shù)前準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)膠質(zhì)瘤級(jí)別、微血管密度和Ki-67標(biāo)記指數(shù)對(duì)臨床上治療方案的選擇、腫瘤預(yù)后的評(píng)價(jià)具有非常重要的意義。
動(dòng)態(tài)磁敏感對(duì)比增強(qiáng)(dynamic susceptibility contrast-enhanced imaging,DSC)是臨床上最主要的磁共振灌
3、注方法,已有多數(shù)研究表明DSC有助于評(píng)價(jià)膠質(zhì)瘤級(jí)別、微血管密度。動(dòng)脈自旋標(biāo)記技術(shù)(arterial spin labeling,ASL)是一項(xiàng)新穎的磁共振灌注方法,它不使用對(duì)比劑,以磁化標(biāo)記的動(dòng)脈血作為內(nèi)源性標(biāo)記物。目前,ASL技術(shù)在膠質(zhì)瘤中的應(yīng)用仍主要處于初步臨床和實(shí)驗(yàn)研究階段,相關(guān)報(bào)道不多。本研究旨在探討磁共振灌注成像ASL與DSC法在評(píng)價(jià)膠質(zhì)瘤級(jí)別、微血管密度和Ki-67標(biāo)記指數(shù)中的應(yīng)用價(jià)值。
方法:
收集20
4、12年12月至2014年9月間本院原發(fā)膠質(zhì)瘤病例38例。所有病例均首次診斷為膠質(zhì)瘤;入組前未接受手術(shù)及放化療等治療;術(shù)前一周完成顱腦常規(guī)MRI及磁共振灌注成像ASL、DSC檢查,術(shù)后經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)為膠質(zhì)瘤。膠質(zhì)瘤的組織病理學(xué)分級(jí)依據(jù)世界衛(wèi)生組織2007年中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類方法。所有患者均簽署了知情同意書。磁共振灌注成像ASL法采用脈沖式動(dòng)脈自旋標(biāo)記(pulsed arterial spin labeling,PASL)技術(shù)。 DSC
5、法采用單次激發(fā)梯度回波-平面回波序列(GRE-EPI)序列。將采集的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入Siemens后處理工作站,用Perfusion軟件包處理獲得DSC法的腦血流量(cerebral blood f low, CBF)圖、腦血容量(cerebral blood volume,CBV)圖。用隨機(jī)軟件處理獲得ASL法的CBF圖。觀測(cè)所得各組灌注圖,并結(jié)合常規(guī)MR平掃及增強(qiáng)掃描圖像,避開腫瘤內(nèi)出血、壞死囊變區(qū),選取腫瘤實(shí)性部分最大血流灌注區(qū)設(shè)置感
6、興趣區(qū),同時(shí)取同層面對(duì)側(cè)灰質(zhì)作為對(duì)照,并測(cè)量相應(yīng)的CBF、CBV值。每個(gè)感興趣區(qū)測(cè)量3次,求平均值,然后分別計(jì)算其比值,得出標(biāo)準(zhǔn)的灌注參數(shù)如:相對(duì)腦血容量(relative cerebral bloodvolume,rCBV),相對(duì)腦血流量(relative cerebral blood f low, rCBF)。
Ki-67檢測(cè)用Ki-67抗原的單克隆抗體MIB-1(Dako S.A.,Glostrup,Denmark)對(duì)膠
7、質(zhì)瘤組織切片進(jìn)行免疫組化染色。染色后的膠質(zhì)瘤組織切片由兩名有經(jīng)驗(yàn)的神經(jīng)病理學(xué)醫(yī)師評(píng)價(jià)。凡是細(xì)胞核著色的膠質(zhì)瘤細(xì)胞均被認(rèn)為是陽性,Ki-67標(biāo)記指數(shù)(ki-67 labeling index,Ki-67 LI)認(rèn)定為陽性細(xì)胞占所有查數(shù)細(xì)胞的百分比。MVD檢測(cè)用血管內(nèi)皮細(xì)胞特定的CD34抗原的單克隆抗體clone QBEND/10(BioGenex,San Ramon,Calif)對(duì)腫瘤組織切片進(jìn)行免疫組化染色。數(shù)字圖像由顯微鏡(BX51;
8、Olympus)和數(shù)字照相機(jī)(DP50-CU; Olympus)獲得,一個(gè)放大400倍的高倍鏡視野用于生成光學(xué)放大圖像。在每一個(gè)樣本上選擇3個(gè)獨(dú)立的區(qū)域,查數(shù)并記錄每一個(gè)高倍鏡視野下的MVD值并計(jì)算平均值。MVD的查數(shù)方法依照Weidner[24]法。應(yīng)用SPSS17.0軟件包,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±s)表示。首先對(duì)膠質(zhì)瘤各灌注參數(shù)值進(jìn)行正態(tài)分布及方差齊性檢驗(yàn)(Welch test)。膠質(zhì)瘤的ASL、DSC各灌注參數(shù)與組織病理
9、學(xué)參數(shù)間的相關(guān)關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
所有用于組織病理學(xué)分析的膠質(zhì)瘤組織均經(jīng)手術(shù)獲得,并最終診斷為膠質(zhì)瘤,其中包括膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(Ⅳ級(jí))15例,間變性星形細(xì)胞瘤(Ⅲ級(jí))7例,間變性少突星形細(xì)胞瘤(Ⅲ級(jí))3例,星形細(xì)胞瘤(Ⅱ級(jí))9例,彌漫性星形細(xì)胞瘤(Ⅱ級(jí))2例,少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤(Ⅱ級(jí))2例。膠質(zhì)瘤T1WI上多呈低信號(hào),T2WI上呈高信號(hào),腫瘤周圍常伴有長(zhǎng)T1長(zhǎng)T2信號(hào)水腫
10、影。增強(qiáng)掃描后低級(jí)別膠質(zhì)瘤無強(qiáng)化或僅見輕度強(qiáng)化,高級(jí)別膠質(zhì)瘤則呈明顯強(qiáng)化,腫瘤內(nèi)常見斑片狀無強(qiáng)化的囊變壞死區(qū)。在ASL、DSC灌注圖上低級(jí)別膠質(zhì)瘤多呈低灌注,高級(jí)別膠質(zhì)瘤多呈高灌注。高級(jí)別膠質(zhì)瘤ASL-CBF、DSC-rCBV、DSC-rCBF值均明顯高于低級(jí)別膠質(zhì)瘤,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05。在膠質(zhì)瘤ASL、DSC各灌注參數(shù)值與MVD、Ki-67 LI的Pearson相關(guān)性分析中DSC-rCBF, DSC-rCBV, ASL-rCB
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