茶皂素經(jīng)口毒性的致突變性與亞慢性實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過(guò)Wistar大鼠亞慢性經(jīng)口實(shí)驗(yàn)和組合的三個(gè)致突變實(shí)驗(yàn)，確定茶皂素對(duì)Wistar大鼠亞慢性毒性作用特征及相關(guān)毒作用部位，分析茶皂素的誘變性，為茶皂素的毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)及進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究增加可信的毒理學(xué)資料。
　　方法：選88只Wistar大鼠雌雄各半，隨機(jī)分4組，茶皂素染毒劑量的低、中、高組分別為20mg/kg、100mg/kg、500mg/kg，對(duì)照組給予無(wú)菌蒸餾水，通過(guò)90天亞慢性經(jīng)口灌胃染毒實(shí)驗(yàn)觀察茶皂素對(duì)大鼠的中毒

2、表現(xiàn)，記錄每周的體重及進(jìn)食量，定量檢測(cè)染毒末期的血常規(guī)、血液生化等各項(xiàng)指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物解剖后留取相關(guān)器官進(jìn)行病理組織學(xué)觀察。通過(guò)三項(xiàng)致突變實(shí)驗(yàn)檢測(cè)茶皂素的致突變性，三項(xiàng)致突變實(shí)驗(yàn)包括Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)及小鼠睪丸精母細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)。
　　結(jié)果：1.茶皂素亞慢性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)期間各組動(dòng)物無(wú)死亡及其它明顯異常表現(xiàn)；高劑量組雄性大鼠的周平均體重從第9周開(kāi)始至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，與對(duì)照組比較，差異有顯著性（P＜0.05，

3、P＜0.01），而血常規(guī)（白細(xì)胞）、臟器系數(shù)（腦、脾、肺）與對(duì)照組相比明顯增高（P<0.05），中劑量組的肺臟器系數(shù)也明顯增高（P<0.05）；高劑量組雌鼠的生化指標(biāo)（谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、血清膽堿酯酶）與對(duì)照組相比明顯增高（P<0.05），而白蛋白與對(duì)照組相比降低（P<0.05）。尿常規(guī)檢查各指標(biāo)均無(wú)顯著性變化，低劑量各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，未見(jiàn)明顯異常情況。
　　2.茶皂素致突變性實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在2.5~50mg/ml劑量范圍內(nèi)，對(duì)陰性對(duì)

4、照組相比，茶皂素各劑量組雌雄小鼠微核率差異無(wú)顯著性(P>0.05)，而陽(yáng)性對(duì)照組的雌雄小鼠微核率明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。受試物各組未成熟紅細(xì)胞占紅細(xì)胞總數(shù)的比例均大于陰性對(duì)照組的20％，表明茶皂素不能誘導(dǎo)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核形成和抑制骨髓細(xì)胞分裂；在5~5000μg/皿劑量范圍內(nèi)，茶皂素對(duì)測(cè)試菌株無(wú)明顯抑菌作用，且各劑量組回變菌落數(shù)均未超過(guò)陰性對(duì)照菌落數(shù)2倍，亦無(wú)劑量-反應(yīng)關(guān)系，表明Ames試驗(yàn)結(jié)果為陰性；在12

5、5~500mg/ml劑量范圍內(nèi)，茶皂素各劑量組小鼠睪丸細(xì)胞染色體畸變率與對(duì)照組比較均有增加，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），而陽(yáng)性對(duì)照組的畸變率明顯增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0001），表明茶皂素不能誘導(dǎo)雄性小鼠生殖細(xì)胞染色體畸變。結(jié)論：1、茶皂素對(duì)Wistar雌、雄大鼠的亞慢性（3個(gè)月）經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)未觀察到有害作用的劑量(NOAEL）為20mg/(kg BW)，最小觀察到有害作用劑量(LOAEL）為100mg/(kg BW)。