半滑舌鰨養(yǎng)殖群體遺傳性別和表型性別研究.pdf

1、半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis Günther)是一種近海溫水性大型底層魚類,具有個(gè)體大、生長快、食性溫和、活動(dòng)范圍小、營養(yǎng)等級低、市場價(jià)值高等優(yōu)良性狀。半滑舌鰨雌性個(gè)體生長速度比雄性個(gè)體快2-4倍,成熟的雌性個(gè)體體長為同期雄性個(gè)體的2倍左右。所以進(jìn)行半滑舌鰨全雌化和高雌性比例育苗,會(huì)帶來很高的經(jīng)濟(jì)效益。本研究利用本實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)并篩選的微衛(wèi)星雌性特異性引物進(jìn)行了三個(gè)方面的研究,從分子生物學(xué)的角度分析魚類性別決定因素

2、。一是利用性別連鎖微衛(wèi)星標(biāo)記引物對卵裂雌核發(fā)育胚胎 DNA進(jìn)行擴(kuò)增;二是利用性別連鎖微衛(wèi)星標(biāo)記對9個(gè)普通家系 F1代進(jìn)行雌性比例調(diào)查,并對其中4個(gè)家系進(jìn)行遺傳性別與表型性別對比,調(diào)查普通家系的遺傳性別比例和性逆轉(zhuǎn)比例;三是利用性別連鎖微衛(wèi)星標(biāo)記檢測了兩個(gè)養(yǎng)殖群體生長過程中雌性比例的變化特征并結(jié)合生理切片觀察結(jié)果跟蹤了半滑舌鰨性腺發(fā)育的全過程。主要研究結(jié)果如下:
　　1、利用本實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)并篩選的性別連鎖微衛(wèi)星標(biāo)記引物 scaffol

3、d1128_343對卵裂雌核發(fā)育胚胎 DNA進(jìn)行擴(kuò)增;先用已知雌雄的半滑舌鰨各12條對該引物進(jìn)行驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)該微衛(wèi)星標(biāo)記可以準(zhǔn)確的鑒定半滑舌鰨的遺傳性別。用該引物對卵裂雌核發(fā)育胚胎 DNA進(jìn)行擴(kuò)增結(jié)果顯示在39枚卵裂雌核發(fā)育胚胎中有4枚胚胎只擴(kuò)增出雌性條帶,即為超雌魚胚胎。本研究證實(shí)該半滑舌鰨微衛(wèi)星雌性特異性標(biāo)記可用于日后超雌魚的鑒定,為以后在實(shí)踐中鑒定超雌魚提供了方法。
　　2、利用半滑舌鰨性別連鎖微衛(wèi)星標(biāo) scaffold1128

4、_343于2011年3月對半滑舌鰨萊州9個(gè)普通家系的F1代各58尾剪取鰭條提取基因組 DNA進(jìn)行遺傳性別檢測,檢測結(jié)果顯示9個(gè)普通家系中遺傳雌性百分比最高為55.00％,最低為37.93%。2011年6月對其中4個(gè)家系采集各96尾再次進(jìn)行遺傳性別檢測以及相對應(yīng)表型性別鑒定,計(jì)算出不同家系性逆轉(zhuǎn)率。結(jié)果表明4個(gè)家系遺傳性別比例和性逆轉(zhuǎn)率有很明顯的家系特征。本研究證實(shí)可以根據(jù)家系遺傳雌性比例和性逆轉(zhuǎn)比例特征選育雌性比例高且反轉(zhuǎn)比例低的家系進(jìn)

5、行下一步繁育,為半滑舌鰨全雌苗種或高雌性比率苗種培育提供了重要參考資料。
　　3、利用性別連鎖微衛(wèi)星標(biāo)記 scaffold1128_343檢測了兩個(gè)養(yǎng)殖群體生長過程中雌性比例的變化特征和半滑舌鰨性腺發(fā)育的觀察。通過對兩個(gè)養(yǎng)殖群體遺傳雌性比例檢測發(fā)現(xiàn)兩個(gè)群體從12日齡到76日齡的所采集的總數(shù)中雌性比例分別為49%和48%,這符合1:1的遺傳雌性比例。將遺傳性別鑒定和生理切片觀察結(jié)果相結(jié)合跟蹤了從25日齡到兩年性成熟整個(gè)半滑舌鰨性腺發(fā)