生物大分子拆分氧氟沙星對(duì)映體的研究.pdf

1、因手性藥物兩種對(duì)映體的藥理學(xué)、毒理學(xué)及在生物體內(nèi)代謝活性不同,使得生物體內(nèi)常見(jiàn)的手性特征在制藥行業(yè)引起了廣泛的關(guān)注。2010年,相關(guān)部門(mén)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示十分之七的暢銷(xiāo)處方藥都是手性藥物。生物大分子如蛋白、核酸等,因其特有的手性特征及無(wú)細(xì)胞毒性被廣泛用于手性拆分過(guò)程中。本文旨在通過(guò)生物大分子作為手性選擇劑聯(lián)合超濾膜過(guò)程以及結(jié)晶純化的方法來(lái)實(shí)現(xiàn)氧氟沙星對(duì)映體的富集。
　　首先,通過(guò)圓二色光譜和熒光光譜研究牛血清白蛋白(BSA)、小牛胸腺D

2、NA(ct-DNA)和魚(yú)精DNA(fs-DNA)與手性氧氟沙星兩種對(duì)映體的相互作用,發(fā)現(xiàn)BSA優(yōu)先結(jié)合R-對(duì)映體,而ct-DNA優(yōu)先結(jié)合S-對(duì)映體,但是fs-DNA并沒(méi)有手性識(shí)別能力。其次,考察了pH值、手性選擇劑濃度對(duì)手性拆分性能的影響,結(jié)果表明在pH9.0的條件下,以BSA作為手性選擇劑時(shí)滲透液的對(duì)映體過(guò)量值(e.e.P)值為10％(S),而在pH5.0下,以小牛胸腺DNA作為手性選擇劑時(shí)滲透液的e.e.P值為14%(R)。當(dāng)BSA

3、濃度為0.3mM時(shí),ct-DNA堿基濃度為3mM時(shí)達(dá)到最佳拆分效果。然后,通過(guò)多級(jí)吸附對(duì)氧氟沙星對(duì)映體進(jìn)行純化,以BSA作為手性選擇劑經(jīng)過(guò)5級(jí)吸附后e.e.P為44%(S),而經(jīng)ct-DNA的5級(jí)吸附后e.e.P可達(dá)85%(R)。最后,利用結(jié)晶的方法對(duì)氧氟沙星對(duì)映體富集溶液進(jìn)行純化,初始e.e.為44%(S)的對(duì)映體富集溶液可進(jìn)一步純化到95%(S)。本文還嘗試將BSA固載在聚砜超濾膜上,衰減全反射紅外結(jié)果表明BSA可成功接枝到聚砜膜表