蜘蛛神經(jīng)細(xì)胞的急性分離及其電壓門控鈉通道的膜片鉗研究.pdf

1、本文以擬環(huán)紋豹蛛為實(shí)驗(yàn)材料，探討了蜘蛛神經(jīng)細(xì)胞急性分離的方法，并對(duì)神經(jīng)細(xì)胞分離培養(yǎng)用液的配置進(jìn)行了摸索。利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)首次對(duì)擬環(huán)紋豹蛛經(jīng)急性分離的神經(jīng)細(xì)胞的電壓門控性鈉、鉀的基本電生理學(xué)特性進(jìn)行了研究。最后對(duì)比分析了擬除蟲菊酯類殺蟲劑氯氰菊酯及不同濃度的氯氰菊酯對(duì)擬環(huán)紋豹蛛成蛛離體中樞神經(jīng)細(xì)胞Na+通道門控過程的影響。研究結(jié)果表明，解剖出的擬環(huán)紋豹蛛頭胸部神經(jīng)團(tuán)在消化酶和培養(yǎng)液混合作用下能急性分離出單個(gè)神經(jīng)細(xì)胞，而且適合用于膜片鉗

2、實(shí)驗(yàn)研究。但急性分離所獲得的神經(jīng)細(xì)胞須在4-6小時(shí)內(nèi)用于膜片鉗研究。在全細(xì)胞電壓鉗條件下，分別能記錄到電壓門控性鈉、鉀通道電流，其中鈉電流在-60mV左右激活，+10mV左右達(dá)峰值，對(duì)河豚毒素敏感；鉀電流為一系列緩慢激活、幾乎沒有失活的電流。用氯氰菊酯處理后，Na+通道的激活電壓向超極化方向移動(dòng)在-70mV，而峰值提前在+5mV左右出現(xiàn)，INa先增大然后迅速減小，意味著激活電壓降低，通道更易激活，Na+通道關(guān)閉延遲，開放時(shí)間延長，引起重