蜘蛛神經細胞的急性分離及其電壓門控鈉通道的膜片鉗研究.pdf

1、本文以擬環(huán)紋豹蛛為實驗材料，探討了蜘蛛神經細胞急性分離的方法，并對神經細胞分離培養(yǎng)用液的配置進行了摸索。利用全細胞膜片鉗技術首次對擬環(huán)紋豹蛛經急性分離的神經細胞的電壓門控性鈉、鉀的基本電生理學特性進行了研究。最后對比分析了擬除蟲菊酯類殺蟲劑氯氰菊酯及不同濃度的氯氰菊酯對擬環(huán)紋豹蛛成蛛離體中樞神經細胞Na+通道門控過程的影響。研究結果表明，解剖出的擬環(huán)紋豹蛛頭胸部神經團在消化酶和培養(yǎng)液混合作用下能急性分離出單個神經細胞，而且適合用于膜片鉗

2、實驗研究。但急性分離所獲得的神經細胞須在4-6小時內用于膜片鉗研究。在全細胞電壓鉗條件下，分別能記錄到電壓門控性鈉、鉀通道電流，其中鈉電流在-60mV左右激活，+10mV左右達峰值，對河豚毒素敏感；鉀電流為一系列緩慢激活、幾乎沒有失活的電流。用氯氰菊酯處理后，Na+通道的激活電壓向超極化方向移動在-70mV，而峰值提前在+5mV左右出現(xiàn)，INa先增大然后迅速減小，意味著激活電壓降低，通道更易激活，Na+通道關閉延遲，開放時間延長，引起重