微乳體系中磷脂酰膽堿的酶解研究.pdf

1、生物化學(xué)的高速發(fā)展和生物工程技術(shù)的不斷革新，為磷脂的改性研究提供了一系列新的概念和先進(jìn)的技術(shù)手段，酶技術(shù)無(wú)疑是其中極為引人注目的一項(xiàng)。 相對(duì)于傳統(tǒng)的水相反應(yīng)體系，微乳液體系因其簡(jiǎn)單、低廉的制備手段和高效的反應(yīng)效率，引起人們的關(guān)注。論文首先研究了，以PC作為表面活性劑和反應(yīng)底物，與正丁孵、異辛烷、水配制微乳液的條件和方法，并研究了該體系的相行為，繪制了擬三元相圖。在50℃時(shí)，正丁醇：異辛烷=1：10的比例下，PC形成的微乳區(qū)域最大

2、，具體條件為：PC80/正丁醇+異辛烷/水的質(zhì)量比為11：70：9。通過(guò)透射電鏡觀察，該體系內(nèi)的微乳顆粒呈球狀，分散良好，平均粒徑在8nm左右。 其次，重點(diǎn)研究了微乳體系中磷脂酶A<,1>水解PC生成LPC的反應(yīng)，并對(duì)影響反應(yīng)的諸多因素，包括底物濃度、酶濃度、水分含量、pH、溫度進(jìn)行了研究；在此基礎(chǔ)上利用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)對(duì)有交互作用的因素進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，并得出最佳的工藝條件為：PC80濃度48.871mg/mL，酶濃度0.342mg/m

3、L，W<,0>為11.237、pH5.0和溫度50℃。產(chǎn)物經(jīng)HPLC分析，LPC反應(yīng)轉(zhuǎn)化率達(dá)到95.2％。 最后還研究了在非水相介質(zhì)中磷脂酶A<,1>水解PC生成GPC的反應(yīng)。比較了單一脂肪酶435、lecitase 10L、lecitase Ultra水解PC的能力，和復(fù)合酶水解PC的能力，并選擇采用單一磷脂酶A<,1>制備GPC的反應(yīng)途徑。論文還對(duì)溶劑體系、界面性質(zhì)以及水分含量對(duì)GPC制備反應(yīng)的影響作了分析。此外，綜合利用溶