利拉魯肽對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖、遷移、炎癥以及成骨分化潛能的影響.pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩63頁(yè)未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  本次研究探討利拉魯肽(Liraglutide,LIRA)對(duì)牙周炎潛在的治療作用。選用經(jīng)典革蘭陰性菌E.Coli的LPS和人牙周膜細(xì)胞(Human periodontal ligament cells,hPDLCs)共培養(yǎng)來(lái)模擬牙周炎的病理過(guò)程,體外分析LIRA對(duì)LPS作用下hPDLCs增殖、遷移、炎癥以及成骨分化潛能的影響。
  方法:
  采用組織塊酶消化法原代培養(yǎng)hPDLCs,免疫組織化學(xué)染色法鑒定細(xì)胞

2、來(lái)源;茜素紅染色分析原代培養(yǎng)獲得的細(xì)胞是否擁有骨向分化潛能;qRT-PCR鑒定hPDLCs是否表達(dá)胰高血糖素樣肽-1受體(Glucagon-like peptide,GLP-1receptor,GLP-1R);MTT法篩選LIRA和E.Coli LPS最佳作用濃度和時(shí)間并分析LIRA對(duì)LPS刺激下hPDLCs增殖活性的影響;劃痕試驗(yàn)分析LIRA對(duì)hPDLCs遷移能力的影響;qRT-PCR和Western Blot分析LIRA對(duì)LPS刺激

3、下hPDLCs炎癥因子表達(dá)(IL-6和TNF-α)以及成骨因子表達(dá)(ALP和Runx2)的影響。
  結(jié)果:
  1.組織塊酶消化法成功培養(yǎng)獲得hPDLCs,經(jīng)免疫組化染色鑒定:抗波形絲蛋白陽(yáng)性、抗角形蛋白陰性,證明細(xì)胞來(lái)源于間充質(zhì),茜素紅染色證實(shí)了hPDLCs的成骨分化能力。
  2.qRT-PCR結(jié)果顯示hPDLCs上存在GLP-1R mRNA的表達(dá),并且LIRA可增加GLP-1R mRNA的表達(dá)。
  3.

4、MTT結(jié)果:25,50,75,100,125nM LIRA培養(yǎng)24h后,均可增強(qiáng)hPDLCs的增殖活性(P<0.05),并呈劑量依賴性;認(rèn)為100nM為L(zhǎng)IRA的最佳藥物濃度。低濃度LPS(0.1,1,10μg/ml)可促進(jìn)hPDLCs的增殖活性,而高濃度LPS(100μg/ml)則抑制hPDLCs的增殖活性(P<0.05),呈時(shí)間依賴性;因此,選擇10μg/ml LPS與hPDLCs共培養(yǎng)來(lái)模擬牙周炎的發(fā)病過(guò)程。再者,LIRA可減弱高

5、濃度LPS對(duì)hPDLCs增殖活性的抑制作用(P<0.05)。
  4.劃痕試驗(yàn)結(jié)果:LIRA可促進(jìn)hPDLCs的遷移能力,呈時(shí)間依賴性。
  5.qRT-PCR結(jié)果:炎癥因子,與對(duì)照組相比,LPS組顯著增加IL-6和TNF-αmRNA的表達(dá)(P<0.01),LIRA組則可抑制IL-6和TNF-αmRNA的表達(dá)(P<0.05);而與LPS組相比,LPS+LIRA組顯著降低IL-6和TNF-αmRNA的表達(dá)(P<0.01)。成骨

6、因子,與對(duì)照組相比,LIRA組和LPS組均可增加ALP和Runx2mRNA的表達(dá)(P<0.05);而與LPS組相比,LPS+LIRA組則抑制ALP和Runx2mRNA的表達(dá)(P<0.05)。
  6.Western Blot結(jié)果:炎癥因子表達(dá)結(jié)果與qRT-PCR結(jié)果基本一致;成骨因子表達(dá)結(jié)果則與qRT-PCR結(jié)果略有差異:與對(duì)照組相比,LIRA明顯促進(jìn)ALP和Runx2蛋白的表達(dá)(P<0.05),而LPS組則可抑制ALP和Runx

7、2蛋白的表達(dá)(P<0.05);而與LPS組相比,LPS+LIRA組則明顯增加ALP和Runx2蛋白的表達(dá)(P<0.05)。
  結(jié)論:
  1.hPDLCs上存在GLP-1R的表達(dá),LIRA可促進(jìn)GLP-1R的表達(dá),并促進(jìn)hPDLCs的增殖活性和遷移能力;
  2.LPS可誘導(dǎo)hPDLCs炎癥反應(yīng),而抑制hPDLCs成骨分化,即LPS與hPDLCs共培養(yǎng)可以模擬牙周炎的病理過(guò)程;
  3.LIRA不僅可以抑制hP

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論