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文檔簡介
1、目的:本文討論紅景天提取物、刺五加提取物和紅景天聯合刺五加提取物對肝纖維化的調控作用。
方法:采用70%乙醇熱回流法提取紅景天及刺五加,條件為80℃恒溫水浴,提取2次(第一次料液比為1:10,第二次料液比為1:8),每次1.5h。通過體內實驗和體外實驗來探討紅景天提取物、刺五加提取物以及紅景天聯合刺五加提取物對肝纖維化的保護作用。體外實驗通過MTT實驗,測定不同濃度(1280、640、320、160、80、40、20、10、0
2、 ug/mL)的三種提取物對t-HSC細胞活力的影響;將細胞給藥濃度設定為為80ug/mL、160ug/mL,通過Western Blotting免疫蛋白印跡實驗來評估t-HSC細胞中Bax、Bcl-2、XIAP、FLIPL、Caspas-3、Caspase-8、Csapase-9的表達。體外實驗通過對ICR小鼠腹腔注射TAA溶液,前1周100mg/kg,注射3次,后4周200mg/kg,每周3次,連續(xù)5周,制作小鼠肝纖維化模型。分別灌
3、胃給予小鼠不同劑量(100 mg/kg、200mg/kg、300mg/kg)的提取物,每天1次,連續(xù)5周。采集血清和肝臟存于-80℃。用自動生化分析儀測定血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)活性的變化及肝質量指數,并用病理組織切片來觀察三種提取物對小鼠肝纖維化的保護作用。
結果:紅景天,刺五加,紅景天聯合刺五加的浸膏得率分別為:5.12%,2.64%,5.51%。體內實驗通過MTT結果表明,三種提取物
4、均能在一定程度上抑制t-HSC細胞的增殖,其中紅景天聯合刺五加提取物在80-160ug/mL時對抑制t-HSC細胞的增殖效果顯著;通過Western Blotting免疫蛋白印跡實驗結果表明,紅景天聯合刺五加提取物對t-HSC細胞因子的影響,能有效抑制t-HSC細胞中Bcl-2,XIAP的表達,同時促進Bax,FLIPL,Caspase-3,8,9的活力升高。體外實驗根據實驗中選用造模劑量,可成功構建硫代乙酰胺(TAA)肝纖維化模型,紅
5、景天聯合刺五加提取物可明顯抑制肝纖維化小鼠血清中丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)活性升高;同時可降低肝纖維化小鼠的肝質量指數,結果顯示出,紅景天聯合刺五加提取物具有較好的肝保護能力。
結論:通過體內實驗和體外實驗,結果表明,紅景天提取物、刺五加提取物、紅景天聯合刺五加提取物對t-HSC細胞的增殖具有抑制作用,對硫代乙酰胺(TAA)引起的肝纖維化具有良好的保護作用。紅景天聯合刺五加提取物具有更好的抗肝纖
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