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1、目的:建立小鼠和大鼠急、慢性肝損傷的模型,研究甘草甜素與苦參堿聯(lián)合使用對(duì)肝纖維化以及大鼠肝星狀細(xì)胞的影響,進(jìn)而觀察甘草甜素與苦參堿聯(lián)合用藥對(duì)肝纖維化的防治作用并初步探討其作用機(jī)制。 方法:(1)采用四氯化碳(CCl<,4>)制備小鼠的急性、慢性肝損傷模型,通過(guò)血清酶學(xué)指標(biāo)和組織病理學(xué)觀察不同劑量的甘草甜素與苦參堿合劑對(duì)肝纖維化的保護(hù)作用。(2)采用CCl<,4>誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型,通過(guò)測(cè)定大鼠血清中Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)、層粘
2、蛋白(LN)、透明質(zhì)酸(HA),并作肝組織病理學(xué)形態(tài)分析研究不同劑量合劑治療組的效果。(3)以培養(yǎng)的大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,觀察單用甘草甜素或苦參堿以及聯(lián)合用藥對(duì)活化HSC分泌Ⅰ型膠原、HA和LN的影響;同時(shí)研究甘草甜素與苦參堿聯(lián)合使用對(duì)Fe-NTA致HSC-T6細(xì)胞氧應(yīng)激后的細(xì)胞增殖、Ⅰ型膠原水平、MDA、GSH、SOD及GSH-PX活性的影響。 結(jié)果:(1)在小鼠急、慢性肝損傷模型的基礎(chǔ)之上,甘草甜素與苦參堿合劑
3、組均可降低血清中ALT、AST、LDH、ALP的活性,緩解匯管區(qū)的纖維組織增生。(2)合劑低、中、高各治療組均能顯著改善肝功能,不同程度的降低PC-Ⅲ、LN、HA水平,組織學(xué)檢查也顯示具有抗纖維化作用。(3)研究結(jié)果顯示:在無(wú)包被的塑料培養(yǎng)皿誘導(dǎo)的肝纖維化細(xì)胞模型中,與空白對(duì)照組比較,1~20μmol/L濃度范圍的甘草甜素,1~20 μmol/L濃度范圍的苦參堿均可劑量依賴(lài)地抑制HSC的增殖,并不同程度抑制Ⅰ型膠原、HA和LN分泌,綜合
4、比較各治療組對(duì)HSC分泌Ⅰ型膠原、HA和LN的影響,合用組優(yōu)于單用組,尤以甘草甜素與苦參堿合用組效果最佳。在Fe-NTA誘導(dǎo)氧應(yīng)激模型中,與模型組比較,甘草甜素與苦參堿均可抑制HSC的增殖,其中甘草甜素與苦參堿合用優(yōu)于單用(有顯著性差異),與陽(yáng)性對(duì)照組效果相當(dāng)。各治療組還可降低HSC培養(yǎng)液中Ⅰ型膠原的水平,尤以甘草甜素與苦參堿合用組Ⅰ型膠原水平最低(有顯著性差異)。 結(jié)論:(1)低、中、高合劑組對(duì)小鼠急性肝損傷有很好的保護(hù)作用,
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