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文檔簡介
1、目的:觀察miR-335-5p對高糖狀態(tài)下成骨細(xì)胞增殖、凋亡的影響并探討其可能分子機(jī)制。
方法:用不同濃度葡萄糖培養(yǎng) MC3T3-E1成骨細(xì)胞,并分為正常對照組(葡萄糖濃度5.5mmol/L)、高糖組(葡萄糖濃度22.0mmol/L)、agomir-335-5p組(轉(zhuǎn)染agomir-335-5p,與濃度為22.0mmol/L的葡萄糖共培養(yǎng))及agomir NC組(轉(zhuǎn)染agomir陰性對照,與濃度為22.0mmol/L的葡萄糖共
2、培養(yǎng))。培養(yǎng)7天后,采用MTT比色分析法測定細(xì)胞增殖率,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率,qRT-PCR檢測細(xì)胞miR-335-5p與DKK1 mRNA的表達(dá),Western Blot檢測DKK1及caspase-3的蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:
(1)高糖組MC3T3-E1成骨細(xì)胞miR-335-5p的表達(dá)水平較正常對照組顯著下調(diào),agomir-335-5p組MC3T3-E1成骨細(xì)胞miR-335-5p的表達(dá)水平較高糖組與ago
3、mir NC組均明顯上調(diào)(P<0.05),而DKK1的mRNA表達(dá)水平在各組之間無顯著差異。
(2)與正常對照組相比,高糖組MC3T3-E1成骨細(xì)胞的增殖率明顯降低,凋亡率顯著增加,而與高糖組比較,agomir-335-5p組MC3T3-E1成骨細(xì)胞的增殖率明顯增加,凋亡率顯著降低(P<0.05)。
(3)高糖組MC3T3-E1成骨細(xì)胞DKK1和caspase-3的蛋白表達(dá)水平均顯著高于正常對照組,而agomir-3
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