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1、目的:探討霧化吸入母牛分枝桿菌對(duì)小鼠支氣管哮喘的預(yù)防作用及其與維生素D受體的關(guān)系。
方法:將24只雄性Balb/c小鼠隨機(jī)分為3組:正常對(duì)照組、哮喘模型組、母牛分枝桿菌霧化干預(yù)組,每組8只。哮喘組及干預(yù)組以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏制作小鼠支氣管哮喘模型,對(duì)照組以PBS代替OVA造模,干預(yù)組造模前給予霧化吸入母牛分枝桿菌。每組模型制作后檢測(cè)氣道反應(yīng)性,處死小鼠,收集肺組織和支氣管肺泡灌洗液。用HE染色、AB-P
2、AS染色觀察小鼠肺部炎癥。支氣管肺泡灌洗液(Bronchoalveolarlavage fluid,BALF)行炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù),ELISA法檢測(cè)BALF中的IFN-γ、IL-4、IL-13水平。實(shí)時(shí)定量PCR、免疫組化分別檢測(cè)肺組織VDR mRNA及蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:與哮喘組相比,干預(yù)組小鼠氣道反應(yīng)性明顯降低(P<0.05),與對(duì)照組比較沒(méi)有明顯差別(P>0.05),氣道炎癥病變及粘液分泌明顯減輕,嗜酸性粒細(xì)胞比例明顯降低(
3、P<0.05),BALF中IL-4、IL-13降低(P<0.05),IFN-γ水平明則顯升高(P<0.001),哮喘組成功制作了哮喘模型,對(duì)照組、干預(yù)組造模失敗;與此同時(shí),干預(yù)組肺組織VDR的mRNA水平,VDR蛋白水平明顯降低(P<0.05)。
結(jié)論:VDR在哮喘小鼠中表達(dá)明顯增高,提示VDR參與小鼠哮喘發(fā)病過(guò)程,可能與其在哮喘中表達(dá)增多導(dǎo)致Th1/Th2失衡有關(guān);霧化吸入母牛分枝桿菌能預(yù)防哮喘小鼠模型形成,其機(jī)制可能與其降
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