霧化吸入母牛分枝桿菌預(yù)防小鼠支氣管哮喘的效果觀察.pdf

1、目的:
　　探討霧化吸入母牛分枝桿菌對(duì)小鼠支氣管哮喘的預(yù)防作用及相關(guān)機(jī)制。
　　方法:
　　40只雌性BALB/C小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為5組，每組8只，（22.5ug預(yù)防組（A組）、45.0ug預(yù)防組（B組）、67.5ug預(yù)防組（C組）、正常對(duì)照組（D組）和哮喘模型組（E組））。用雞卵清蛋白(ovalbumin，OVA)腹腔注射致敏和霧化吸入激發(fā)制作小鼠支氣管哮喘模型，每只小鼠每周腹腔注射1次OVA混合試劑致敏，連續(xù)3

2、周，第4周開(kāi)始予OVA·PBS液霧吸激發(fā)，每次30分鐘，隔日1次，連續(xù)5次。預(yù)防組（A、B、C組）在哮喘模型制作前2周連續(xù)5天霧化吸入母牛分枝桿菌混合液10ml，每天1次。所有小鼠在模型制作后24小時(shí)內(nèi)予無(wú)創(chuàng)肺功能儀檢測(cè)小鼠氣道反應(yīng)性，隨后處死小鼠，收集標(biāo)本。病理HE染色、AB-PAS染色觀察肺臟炎癥情況，并進(jìn)行半定量分析;液相芯片法檢測(cè)血清及肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-17A、IFN-γ表達(dá)水平;免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)肺IL

3、-4、IL-5、IL-17A、IFN-γ及γδ-TCR表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　與哮喘模型組比較，母牛分枝桿菌霧化吸入預(yù)防組小鼠氣道反應(yīng)性降低，肺組織炎癥減輕，肺IL-4、IL-5、IL-17A、γδ-TCR表達(dá)水平降低(P值均＜0.05)，IFN-γ表達(dá)水平升高(P＜0.05)，三個(gè)預(yù)防組中以67.5ug預(yù)防組效果最明顯(P＜0.05)。各預(yù)防組免疫組化結(jié)果:IL-4、IL-5、γδ-TCR表達(dá)水平，67.5ug預(yù)防組明

4、顯低于22.5ug、45.0ug預(yù)防組（P值均＜0.05）;IL-17A表達(dá)水平呈量-效負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);IFN-γ表達(dá)水平67.5ug預(yù)防組明顯高于22.5ug、45ug預(yù)防組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　霧化吸入母牛分枝桿菌可以明顯降低支氣管哮喘小鼠氣道反應(yīng)性，減輕氣道炎癥，用于支氣管哮喘的預(yù)防，其機(jī)制可能與其減少支氣管哮喘小鼠肺部γδ-T細(xì)胞聚集，糾正Th1/Th2失衡，抑制Th17型優(yōu)勢(shì)