2型糖尿病與PTPN1、GLUD1基因啟動子區(qū)甲基化的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　2型糖尿?。═ype2 diabetes mellitus，T2DM)是由遺傳與環(huán)境因素等多重因素共同作用而引起慢性葡萄糖代謝紊亂性疾病。表觀遺傳學(xué)是由 Waddington首次提出并用來闡述基因與環(huán)境之間的相互作用對疾病產(chǎn)生的影響。其中，DNA甲基化是T2DM發(fā)生發(fā)展中非常重要的表觀遺傳調(diào)控機制。本研究主要通過對 PTPN1及GLUD1基因的DNA甲基化研究，來探討其 DNA甲基化與 T2DM患病的相關(guān)性，從而為預(yù)測

2、 T2DM的發(fā)生發(fā)展提供可能的生物學(xué)標記。
　　材料和方法：
　　收集深圳南山慢性疾病控制中心非肥胖的T2DM患者及性別、年齡相匹配的正常對照組的外周血樣本各97例。通過 Lab-Aid核酸自動提取儀從外周血液中提取全基因組 DNA，將其亞硫酸鹽修飾后進行 PCR特異性擴增。采用焦磷酸測序技術(shù)檢測 PTPN1、GLUD1候選基因啟動子區(qū)域的DNA甲基化修飾水平。運用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，分析 DNA甲基化與

3、T2DM患病及臨床特征的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　通過焦磷酸測序技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)PTPN1基因啟動子區(qū)域CpG1-8的甲基化水平均高于正常對照組，有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義（15.98±9.18 vs12.00±9.03，P=0.001；8.68±4.48 vs6.41±3.16，P=0.002；6.98±3.11 vs5.57±1.88，P=0.001；18.87±8.09 vs15.46±5.76，P=0.003；7.51±3.69

4、 vs6.23±1.75，P=0.007；5.21±1.24 vs4.60±0.87，P=0.001；5.15±1.60 vs4.84±1.39，P=0.036；4.89±0.76 vs4.37±0.70，P=0.001）；按性別分層后進行分析發(fā)現(xiàn)，在女性中 T2DM的PTPN1基因啟動子區(qū)域的平均甲基化水平與 T2DM的患病具有顯著相關(guān)（P=4.82E-04）；此外，在女性中 PTPN1平均甲基化程度與低密度脂蛋白、總膽固醇呈負相關(guān)性

5、
　?。╮=-0.183，P=0.046；r=-0.310，P=0.001）；而在男性中 PTPN1平均甲基化程度與年齡呈正相關(guān)性（r=0.276，P=0.017）。GLUD1基因啟動子區(qū)域 CpG1-5的甲基化水平均低于正常對照組，有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義（3.87±3.64 vs4.36±1.96，P=0.003；9.77±6.44 vs13.16±7.16，P=2.93E-04；3.48±3.32 vs3.52±1.22，P=0.

6、022；18.57±5.62 vs14.56±6.55，P=3.31E-05；3.75±3.24 vs5.11±2.21，P=4.01E-05）；按性別分層后進行分析發(fā)現(xiàn)，在女性中 T2DM的GLUD1基因啟動子區(qū)域的平均甲基化水平與 T2DM的患病具有顯著相關(guān)（P=0.001）；此外，盡管在男性中 T2DM的GLUD1平均甲基化水平與對照組無顯著差異，但GLUD1平均甲基化程度與肌酐值呈負相關(guān)性（r=-0.290，P=0.013）。<