Pn-1表達(dá)與腎透明細(xì)胞癌脈管生成的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　腎癌是最常見的腎實質(zhì)惡性腫瘤，其中80％為腎透明細(xì)胞癌。其起病隱匿，惡性程度高，可發(fā)生于各個年齡階段，嚴(yán)重威脅人類健康。由于起病初期無典型癥狀，早期診斷相對困難。且腎癌對放療、化療均不敏感，治療仍以手術(shù)治療為主。但約50％的病人就診時已處晚期，35％的病人已合并遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，故手術(shù)治療效果有限。近年來，生物治療及靶向治療取得一定進(jìn)展，但也存在價格昂貴，治療效果有限等不利因素。
　　蛋白酶Nexin-1(proteas

2、e nexin-1，PN-1)，屬Serpin類超家族，又名serpinE2。為一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，Monard等在20世紀(jì)80年代發(fā)現(xiàn)，主要存在于組織及血小板中。PN-1不僅在組織發(fā)育，而且在出血和凝血中均發(fā)揮重要作用。最新研究表明，PN-1廣泛表達(dá)于多種腫瘤，如乳腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、睪丸癌組織中。
　　惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵襲涉及因素眾多，相關(guān)過程復(fù)雜。新生血管及淋巴管的生成在腫瘤的發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程中扮演著重要角色。

3、PN-1可借助多種蛋白酶、細(xì)胞外信號激酶信號通路為途徑，參與腫瘤細(xì)胞的增生、分化和凋亡過程。同時，PN-1可通過與蛋白聚糖介導(dǎo)內(nèi)化的配伍作用，促使ERK信號通路被激活，進(jìn)而調(diào)節(jié)整合素，加速細(xì)胞間的擴散速度，使其直接參與血管新生及腫瘤生長的全過程。在關(guān)于口腔扁平細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌以及睪丸癌的研究中，對于并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤組織，PN-1所占比例明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤組織，提示PN-1可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。然而PN-1與腎透明細(xì)胞癌脈管

4、生成的關(guān)系尚未見相關(guān)報道。
　　本實驗選取50例腎透明細(xì)胞癌組織，以及50例切緣正常腎組織。采用免疫組化(sp)法檢測PN-1、CD34和LYVE-1的表達(dá);采用原位雜交法檢測50例腎透明細(xì)胞癌組織以及50例切緣正常腎組織中PN-1mRNA的表達(dá)，探討蛋白酶PN-1與腎透明細(xì)胞癌脈管生成的關(guān)系。
　　方法：
　　1.采用免疫組化方法檢測50例腎透明細(xì)胞癌組織及50例切緣正常腎組織中蛋白酶PN-1蛋白表達(dá)。探討PN-1蛋

5、白表達(dá)與腎透明細(xì)胞癌發(fā)生的關(guān)系。
　　2.采用原位雜交方法檢測50例腎透明細(xì)胞癌組織及50例切緣正常腎組織中蛋白酶PN-1mRNA表達(dá)。探討PN-1mRNA表達(dá)與腎透明細(xì)胞癌發(fā)生的關(guān)系。
　　3.采用免疫組化方法檢測50例腎透明細(xì)胞癌組織及50例切緣正常腎組織中CD34表達(dá)并計算MVD值;探討PN-1蛋白及mRNA表達(dá)與腎透明細(xì)胞癌血管生成的關(guān)系。
　　4.采用免疫組化方法檢測50例腎透明細(xì)胞癌組織及50例切緣正常腎組

6、織中LYVE-1表達(dá)并計算LMVD值;探討PN-1蛋白及mRNA表達(dá)與腎透明細(xì)胞癌淋巴管生成的關(guān)系。
　　5.數(shù)據(jù)處理:實驗數(shù)據(jù)處理使用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計量資料符合正態(tài)分布，統(tǒng)計分析采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(X)±S）表示;陽性率比較采用x2檢驗(chi-square);計量資料均數(shù)間的比較采用t檢驗(t-test)或方差分析(one-way ANOVA);以α=0.05為顯著性檢驗水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.在腎

7、透明細(xì)胞癌組織中，PN-1的蛋白陽性表達(dá)率70.00％(35/50)較正常腎組織14.00％(7/50)升高，且差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。PN-1陽性表達(dá)率與TMN分期，腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)，且差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05）。而患者的年齡、性別與蛋白酶PN-1陽性表達(dá)率無關(guān)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。
　　2.在腎透明細(xì)胞癌組織中，PN-1 mRNA的陽性表達(dá)率60.00％(30/50)較正常腎

8、組織16.00％(8/50)升高，且差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。PN-1 mRNA陽性表達(dá)率與腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，TMN分期相關(guān)，差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05)。而患者的年齡、性別與蛋白酶PN-1mRNA陽性表達(dá)率無關(guān)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。
　　3.腎透明細(xì)胞癌組以CD34標(biāo)記的MVD值為29.21±5.78，而正常腎組織組MVD值為16.58±6.53，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。且