腦苷肌肽對大鼠腦出血后TNF-α,MMP-9,TIMP-1干預的實驗性研究.pdf

1、目的：經(jīng)過大鼠尾狀核腦出血模型的建立，同時給予腦苷肌肽干預，觀察腦苷肌肽對腦出血繼發(fā)性腦損傷中炎性因子（TNF-α）、腦水腫相關(guān)因子(MMP-9、TIMP-1)的影響，探討腦苷肌肽對腦出血后繼發(fā)性腦損傷中炎癥反應、腦水腫的影響及其保護作用。
　　方法：⑴采用立體定位技術(shù)，將50ul大鼠自體鼠尾不凝血注射入大鼠腦尾狀核，建立大鼠腦出血模型。⑵80只SD大鼠被隨機分為四組:對照組、ICH組、小劑量治療組、大劑量治療組;對照組5只，IC

2、H組及大、小劑量治療組每組各25只;每組采取5個時間點觀察:術(shù)后6h、24h、48h、72h和5d，每個時間點選用5只大鼠。⑶給藥方式:向大鼠腹腔內(nèi)注射腦苷肌肽，小劑量治療組按3.15ml/Kg給藥，大劑量治療組按5.25ml/Kg給藥，首次給藥時間為術(shù)后2小時，之后每24小時1次，首次給藥量加倍。對照組及ICH組同一時間點給予同等劑量生理鹽水。⑷術(shù)后2h對腦出血模型進行評價，確定模型是否成功，在擬定的各個時間點對成功模型進行神經(jīng)功能障

3、礙評分。⑸運用免疫組化、圖像分析技術(shù)來觀察并量化TNF-α，MMP9，TIMP-1在各個時間點的變化情況。⑹HE染色觀察腦組織血腫周圍神經(jīng)細胞，炎性細胞及腦組織變化情況。
　　結(jié)果：①神經(jīng)功能障礙:對照組無明顯神經(jīng)功能障礙(P＞0.05)，ICH組及治療組與對照組相比，手術(shù)后2h時間點有明顯神經(jīng)功能障礙(P＜0.05);大小劑量治療組和 ICH組相比，手術(shù)后2h及6h時間點神經(jīng)功能障礙無明顯差異(P＞0.05)，但二者神經(jīng)功能障礙

4、在24h、48h、72h以及5d時間點相比有明顯差異(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，神經(jīng)功能障礙在24h、48h、72h以及5d時間點有明顯差異(P＜0，05)，在6h時間點神經(jīng)功能障礙無明顯差異(P＞0.05)。②腦組織含水量:對照組腦組織含水量在各個時間點無明顯差異(P＞0.05);ICH組腦組織含水量在術(shù)后6h、24h、5d與72小時時間點比較有明顯差異(P＞0.05);ICH組和治療組與對照組相比，腦組織含水量在各個

5、時間點均有增加(P＜0.05);治療組與ICH組相比，在24h、48h、72h及5d腦組織含水量有明顯減少(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，在24h、48h、72h及5d腦組織含水量有明顯減少(P＜0.05)。③TNF-α表達數(shù)量:對照組TNF-α的數(shù)量有少量表達;ICH組TNF-α表達的數(shù)量在6h、24h、48h、5d與72h比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);ICH、治療組與對照組相比，TNF-α表數(shù)量在各個觀察點有所增加(

6、P＜0.05);治療組與ICH組各個觀察點相比，TNF-α表達數(shù)量有所減少(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，各個觀察點TNF-α表達數(shù)量有所減少(P＜0.05)。④MMP-9表達數(shù)量:ICH組及治療組與對照組相比，MMP-9表達數(shù)量在各個觀察點有明顯差異(P＜0.05);ICH組MMP-9陽性表達數(shù)在6h、24h、72h、5d與48h相比，具有明顯差異(P＜0.05);大小劑量治療組與ICH組相比，MMP-9表達數(shù)量在各個觀察

7、點均有減少(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，MMP-9表達數(shù)量在各個觀察點均減少(P＜0.05)。⑤TIMP-1表達數(shù)量:ICH組與對照組相比，TIMP-1表達數(shù)量在各個觀察點具有明顯差異(P＜0.05);ICH組TIMP-1表達數(shù)量在6h、24h、48h、5d與72h相比，具有明顯差異(P＜0.05);大小劑量治療組與ICH組相比，TIMP-1表達數(shù)量在各個觀察點有所增加(P＜0.05);大劑量與小劑量治療組相比，TIMP-

8、1表達數(shù)量在各個觀察點有所增加(P＜0.05)。⑥HE染色:ICH組在術(shù)后各個觀察點，可以看到血腫周圍組織充血水腫明顯，其中大量白細胞浸潤，神經(jīng)元變性壞死;隨著術(shù)后時間點的延長，血腫周圍組織中的膠質(zhì)細胞顯著增多，腦水腫在3d后開始減輕。治療組與ICH組相比，細胞及組織充血水腫相對較輕，炎癥細胞的浸潤明顯減少。大劑量與小劑量治療組相比，腦水腫減輕更為明顯。
　　結(jié)論：⑴采用自體不凝血注入法制作大鼠模型方法簡單，易操作。該腦出血模型與