降鈣素基因相關(guān)肽對大鼠運動性疲勞的影響研究.pdf

1、目的：探討CGRP對大鼠運動性疲勞的影響。
　　 方法：成年健康雄性SD大鼠，依據(jù)動物運動至力竭的時間剔除運動能力太差和運動能力太強的大鼠依據(jù)不同的預(yù)處理措施隨機分成五組：空白對照組、PBS預(yù)處理組、CGRP預(yù)處理組(降鈣素基因相關(guān)肽，calcitonin gene-related peptide，CGRP)、CAP預(yù)處理組(辣椒素，capsaicin，CAP)、CAP預(yù)處理+CGRP預(yù)處理組，各組動物在安靜狀態(tài)時、運動80分鐘

2、時和運動至力竭后即刻處死。然后用免疫組化和放射免疫方法檢測上述條件下大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的表達變化；用HE染色觀察上述條件下運動性疲勞大鼠骨骼肌形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化；用化學(xué)比色的方法檢測上述條件下骨骼肌超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathioneperoxidase，GSH-PX)、過氧化氫酶(catalase，CAT)及丙二醛(malondialdehyde，MDA

3、)的變化。
　　 結(jié)果：①給予CGRP預(yù)處理后，大鼠運動至力竭的時間明顯縮短(P<0.05)，而給予CAP預(yù)處理后大鼠運動至力竭的時間明顯延長(P<0.05)。②CGRP免疫組織化學(xué)和放射免疫結(jié)果顯示：CGRP的免疫陽性產(chǎn)物在肌纖維縱切面上，其形狀為橢圓形或棒狀，主要分布于肌纖維膜的表面。給予CGRP預(yù)處理后，大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的表達明顯升高(P<0.05)，而給予CAP預(yù)處理后，大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的表達

4、明顯下降(P<0.05)。③HE染色顯示：安靜狀態(tài)下各組骨骼肌的形態(tài)結(jié)構(gòu)未見明顯改變；運動80min時與安靜狀態(tài)下相比，除CGRP預(yù)處理組骨骼肌的細胞核明顯增多、增大外，其余各組均無明顯改變；力竭運動后即刻與安靜狀態(tài)下相比除CAP預(yù)處理組無明顯改變外，其余各組骨骼肌的細胞核均明顯增多、增大。④化學(xué)比色結(jié)果顯示：給予CGRP預(yù)處理后，大鼠骨骼肌中SOD、GSH-PX和CAT的活性明顯下降(P<0.05)，MDA的含量明顯上升(P<0.05

5、)，而給予CAP預(yù)處理后大鼠骨骼肌中SOD、GSH-PX和CAT的活性明顯上升(P<0.05)，MDA的含量明顯下降(P<0.05)。
　　 小結(jié)：CGRP加劇了運動性疲勞的產(chǎn)生。
　　 目的：檢測CGRP對運動性疲勞大鼠AChE的影響，探討CGRP對運動性疲勞的作用機制。
　　 方法：實驗動物分組及處理同第一部分。通過免疫組化和組織化學(xué)的方法檢測不同干預(yù)措施條件下運動性疲勞大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE的表達情

6、況和活性變化，并用酶聯(lián)免疫吸附分析和化學(xué)比色法對AChE的表達和活性改變進行定量分析。并對大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的濃度與AChE的表達和活性進行相關(guān)分析和回歸分析。
　　 結(jié)果：①AChE免疫組織化學(xué)、酶聯(lián)免疫吸附分析、組織化學(xué)和化學(xué)比色結(jié)果顯示：給予CGRP預(yù)處理后，大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE的表達和活性顯著降低(P<0.05)。而給予CAP預(yù)處理后大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE的表達和活性顯著升高(P<0.05)

7、。②相關(guān)分析顯示大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的表達量與AChE的表達呈負性相關(guān)，其中安靜狀態(tài)組r=0.78(p=0.000)，80分鐘組r=0.92(p=0.000)，力竭組r=0.88(p=0.000)；CGRP的表達量與AChE的活性也呈負性相關(guān)，其中安靜狀態(tài)組r=0.81(p=0.000)，80分鐘組r=0.92(p=0.000)，力竭組r=0.89(p=0.000)?；貧w分析顯示AChE表達的下降在安靜狀態(tài)組有61％(r2=0

8、.61)，在80分鐘組有85％(r2=0.85)，在力竭組有78％(r2=0.78)的可能是由CGRP的變化引起。AChE活性的下降在安靜組有66％(r2=0.66)，在80分鐘組有84％(r2=0.84)，在力竭組有79％(r2=0.79)的可能是由CGRP的變化引起。提示CGRP濃度的改變與大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE表達和活性的下降呈負相關(guān)。
　　 小結(jié)：CGRP通過調(diào)節(jié)大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE的表達和活性促進了運