擬南芥葉綠體蛋白的亞細(xì)胞定位與功能分析.pdf_第1頁(yè)
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1、葉綠體是植物細(xì)胞特有的細(xì)胞器，除了光合作用外，還參與氨基酸、脂肪酸、植物生長(zhǎng)物質(zhì)、維生素等的合成。在模式植物擬南芥葉綠體中，生物信息學(xué)分析，葉綠體基因組編碼87個(gè)葉綠體蛋白，核基因組編碼約4255個(gè)葉綠體蛋白，但是絕大部分蛋白質(zhì)功能尚不清楚。本論文建立了葉綠體蛋白質(zhì)功能研究的一系列技術(shù)平臺(tái)。 首先，依據(jù)我們實(shí)驗(yàn)室生物信息學(xué)方法構(gòu)建的葉綠體蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)庫(kù)，從中選取了16對(duì)與光合作用相關(guān)新的蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)，利用酵母雙雜交

2、的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。結(jié)果表明其中2對(duì)蛋白質(zhì)具有相互作用：AT2G46820與PSI-L，AT1G15980與ATPG。 我們還利用TargetP軟件對(duì)未知基因的亞細(xì)胞定位進(jìn)行預(yù)測(cè)得到轉(zhuǎn)運(yùn)肽長(zhǎng)度信息，擴(kuò)增包含轉(zhuǎn)運(yùn)肽的序列并與GFP構(gòu)建融合蛋白表達(dá)載體，轉(zhuǎn)基因植株葉片在激光共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)AT5G48790、AT1G16800、AT2G46820定位在葉綠體中，蛋白質(zhì)AT4G16410定位在細(xì)胞質(zhì)中。 為進(jìn)一步

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