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文檔簡介
1、背景:
缺血性膽管疾病是指膽管因血供受損而導致膽管損傷,統稱為缺血性膽管病[1]。缺血性膽管損傷的有些病因明確的,而有些病因至今仍然不甚明了。肝移植時,肝動脈的并發(fā)癥(狹窄或血栓形成)容易導致缺血性膽管損傷[2]。肝動脈化療或栓塞化療后膽管壞死和硬化性膽管炎等是常見的缺血性膽管并發(fā)癥[3]。雖然膽管的血供主要依賴于肝動脈血流,多項研究發(fā)現,肝動脈或其分支(包括膽管周圍血管網)和門靜脈之間也存在著大量的交通支[4,5]。在肝動脈
2、血流出現中斷時,門靜脈通過這些交通支逆向灌注可能在某種程度上能夠代償肝動脈血流不足。因此,當肝動脈供血不足時,或許可以用動脈化的門靜脈通過交通支來營養(yǎng)高氧耗的膽管細胞,預防和治療缺血性膽管病。動脈化的門靜脈能否預防和治療動脈缺血性膽管損傷及其中的具體機制尚不清楚,目前臨床上僅有零星的相關臨床病例報道,但缺乏足夠的實驗研究支持。
目的:
1、探索構建Sprague-Dawley(SD)大鼠部分門靜脈動脈化(partia
3、l portal veinarterialization,PPVA)模型的方法。
2、探索SD大鼠肝臟完全動脈缺血后的膽管損傷機制,并研究PPVA對動脈缺血性膽管損傷是否有保護作用。
方法:
1、通過將大鼠胃十二指腸動脈近心端與門靜脈行端側吻合構建PPVA模型。通過破壞肝臟周圍動脈側支循環(huán)、切斷大鼠肝動脈及結扎膽管周圍血管網以構建膽管完全動脈缺血模型(bile duct ischemia,BDI),然后再施
4、以PPVA手術,觀察手術成功率、術后大鼠術后存活率和肝動脈門靜脈吻合口通暢情況。
2、將80只SD大鼠隨機分為假手術組、PPVA組、BDI組和PPVA+BDI組等4組,術后每組分別于1天、3天和14天處死大鼠,取血清行生化檢查。取肝臟組織行常規(guī)病理檢查和透射電鏡觀察肝臟組織學及超微結構的改變。通過熒光素酶-熒光素法測定大鼠肝臟三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量。通過天狼星紅染色觀察肝臟纖維化
5、情況。熒光定量PCR法測定缺氧、膽汁轉運蛋白和炎癥相關基因的表達情況。western-blot免疫印跡法和免疫組化法檢測低氧誘導因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、炎癥因子腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白和膽汁轉運蛋白表達情況。
結果:
1、PPVA手術技術成功率66.7%,手術時間為25.8±1.1min,門靜脈阻斷時間
6、為5.3±1.3min,彩超證實肝動脈門靜脈吻合口通暢率為90%。PPVA+BDI手術技術成功率70%,手術時間30.1±1.6min,門靜脈阻斷時間為4.0±1.2min,彩超證實肝動脈門靜脈吻合口通暢率為100%。
2、PPVA能改善大鼠膽管動脈缺血后的肝酶損害,避免缺血后造成的膽汁性梗死、膽汁滲出及膽汁瘤形成等。PPVA能提高門靜脈血流氧含量和改善膽管動脈缺血后的肝臟ATP含量。PPVA能減輕肝臟完全動脈缺血后導致的膽管
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