門靜脈動(dòng)脈化對(duì)大鼠肝臟蛋白質(zhì)合成代謝的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、【目的】
　　1、研究完全門靜脈動(dòng)脈化對(duì)部分肝切除后的大鼠的存活情況及肝臟功能的影響。
　　2、研究完全門靜脈動(dòng)脈化時(shí),大鼠部分肝切除后血清中前白蛋白、白蛋白等蛋白質(zhì)及氨基酸譜水平的變化,來探討門靜脈動(dòng)脈化(PVA)對(duì)肝臟蛋白質(zhì)合成代謝功能的影響,進(jìn)而為PVA的臨床應(yīng)用提供參考價(jià)值。
　　【方法】
　　1、采用袖套法建立動(dòng)物模型,袖套法為SD大鼠同種異體血管及薄壁聚乙烯管(袖套)制作,手術(shù)方法為:乙醚半開放麻醉,

2、腹部正中切口,分離左腎動(dòng)靜脈,切除左腎,同種異體血管材料套入左腎動(dòng)脈并縫合斷端,將連接袖套一端與門靜脈近端套入結(jié)扎,左腎靜脈借助袖套與腸系膜上靜脈連接。在此基礎(chǔ)上切除大鼠肝臟左外側(cè)葉加乳頭葉,約占大鼠肝臟的40％,如此建立動(dòng)物模型。分組:SD大鼠30只為A組(門靜脈動(dòng)脈化+40%肝切+左腎切除組),20只為B組(40%肝切+左腎切除組)20只為C組(單純左腎切除組),術(shù)后觀察生存率、外周血肝功能變化、肝再生功能評(píng)估、肝臟病理改變。

3、>　　2、隨機(jī)選取SD大鼠30只為A組(門靜脈動(dòng)脈化+40%肝切+左腎切除組),20只為B組(40%肝切+左腎切除組)20只為C組(單純左腎切除組)建立動(dòng)物模型并記錄手術(shù)時(shí)間、門靜脈阻斷時(shí)間、存活率。于術(shù)后1d、3d、5d、7d、10d五個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)和總蛋白(TP)含量。術(shù)后3d、7d兩個(gè)時(shí)間點(diǎn),全自動(dòng)氨基酸分析儀檢測(cè)血清氨基酸譜水平。
　　【結(jié)果】
　　1、大鼠門靜脈動(dòng)脈化聯(lián)合40%肝

4、臟切除模型的建立
　　1.1門靜脈動(dòng)脈化模型組造模成功率90%(27/30),造模成功的大鼠均存活。術(shù)后1周各組大鼠體重變化相互比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);三組大鼠ALP于術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)相互比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);術(shù)后第3天,A組中AST、ALT較B組、C組均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而CHE較B組、C組均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),提示門靜脈動(dòng)脈化對(duì)早期肝功能恢復(fù)有明顯作用。

5、術(shù)后1周,A組中ALT較B組、C組均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),提示門靜脈動(dòng)脈化對(duì)肝功能恢復(fù)仍有明顯促進(jìn)作用,其余肝功能指標(biāo)比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。術(shù)后1月,各組肝功能指標(biāo)比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　1.2術(shù)后第3天、1周,A組LRR較B組均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);術(shù)后1月,A組LRR較B組升高,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。提示門靜脈動(dòng)脈化,有利于肝臟部分切除術(shù)后早期

6、肝臟再生。
　　1.3術(shù)后1月病理檢查示:三組大鼠肝臟均未見明顯病理性改變。
　　2、大鼠門靜脈動(dòng)脈化聯(lián)合40%肝臟切除后對(duì)大鼠肝臟蛋白質(zhì)合成代謝的影響
　　2.1一般情況:A組手術(shù)成功率93.3%(28/30),B組和C組手術(shù)成功率均100%,A、B、C三組大鼠門靜脈阻斷時(shí)間分別為:(16±2.5)min、15min、15min,平均手術(shù)時(shí)間分別為:(59±5.5)min、(40±4.5)min、(26±1.5)mi

7、n。
　　2.2血清蛋白:A、B兩組大鼠于術(shù)后1、3、5天時(shí),血清前白蛋白(PA)較C組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。A組大鼠于術(shù)后第5天血清前白蛋白(PA)較B組明顯升高,血清總蛋白較C組明顯降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。A、B、C三組大鼠血清白蛋白(ALB)于各時(shí)間點(diǎn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)
　　2.3血清氨基酸譜:I:A、B兩組大鼠于術(shù)后第3d血清中丙氨酸、絡(luò)氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸較C

8、組明顯升高,纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、精氨酸、色氨酸及BCAA/AAA(支/芳)較C組明顯降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其中A組中纈氨酸較B組明顯降低,亮氨酸和賴氨酸較B組明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),甘氨酸、組氨酸較C組降低,蛋氨酸較C組稍升高,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)II:A組大鼠于術(shù)后第7d血清中異亮氨酸、亮氨酸、精氨酸、色氨酸及BCAA/AAA(支/芳)較B組明顯升高,絡(luò)氨酸、苯丙氨酸較B組

9、明顯降低,丙氨酸、賴氨酸較C組升高明顯,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。B組大鼠血清中丙氨酸、絡(luò)氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸較C組明顯升高,異亮氨酸、亮氨酸、精氨酸、色氨酸及BCAA/AAA(支/芳)較C組明顯降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),余氨基酸升高或降低差異相互比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　【結(jié)論】
　　1、利用同種異體的動(dòng)脈血管材料行袖套法建立的大鼠門靜脈動(dòng)脈化模型,血管通暢率高,是一個(gè)可行、穩(wěn)定