部分門靜脈動脈化對梗阻性黃疸大鼠肝門部膽管影響的實驗研究.pdf

1、背景與目的:
　　近年來,隨著肝膽外科診療技術(shù)的逐步提高,肝門部膽管癌的手術(shù)切除率明顯增高,肝臟移植手術(shù)量逐漸增多,肝門部膽管癌擴大根治性切除或肝移植手術(shù)中常常需要切除受侵犯的肝動脈或門靜脈,門靜脈切除可選擇側(cè)壁切除或切除后對端對端吻合、人工血管吻合,但肝動脈切除后常由于殘存動脈較短、管腔閉塞、動脈夾層或解剖變異等,使重建較為困難或不能完成。研究表明,肝動脈結(jié)扎或切除后,部分門靜脈動脈化(APS)的手術(shù)方式重建肝臟、膽管血流,可以

2、顯著提高肝臟及膽管的動脈血供,促進肝臟代謝和肝細胞再生,改善術(shù)后早期肝臟和膽管的缺血缺氧問題,預(yù)防肝臟功能衰竭及減少術(shù)后膽道并發(fā)癥。肝門部膽管癌和肝移植患者幾乎均存在不同程度的黃疸,故本實驗旨在通過建立梗阻性黃疸大鼠的部分門靜脈動脈化模型,了解部分門靜脈動脈化對梗阻性黃疸大鼠肝門部膽管的影響,以期為部分門靜脈動脈化在臨床上應(yīng)用的可行性提供實驗基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1、制作梗阻性黃疸大鼠APS+膽管再通和肝總動脈結(jié)扎+膽管再

3、通的動物模型,以假手術(shù)組及單純梗阻性黃疸行膽管再通組作為對照。
　　2、肝門部膽管病理切片行HE染色,觀察各組肝門部膽管病理學改變;免疫組化行SMA標記,觀察不同手術(shù)后大鼠肝門部膽管壁內(nèi)膜下膽管周圍血管叢中微動脈的改變。
　　3、通過血清生化酶學指標監(jiān)測梗阻性黃疸情況下行HAL后和APS手術(shù)后對肝門部膽道系統(tǒng)的影響。
　　4、末端脫氧苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧三磷酸尿苷(Dutp)缺口末端標記技術(shù)(TUNEL法),檢測不同術(shù)

4、式后膽管細胞的凋亡和壞死情況。
　　結(jié)果:
　　1.與HAL+膽管再通組相比,APS組膽管周圍血管叢中微動脈數(shù)明顯增多,差異具有統(tǒng)計學意義;APS組與單純梗阻性黃疸及假手術(shù)組相比膽管周圍血管叢中微動脈數(shù)差異無統(tǒng)計學意義,各組血清γ-谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶(GGT/γ-GT)比較為肝總動脈結(jié)扎組最高,差異有統(tǒng)計學意義,各組血清堿性磷酸酶(ALP)為肝總動脈結(jié)扎組最高,但差異無統(tǒng)計學意義。
　　2.APS+膽管再通組、HAL+膽管

5、再通組、單純梗黃行膽管再通組肝門部膽管上皮細胞均見有不同程度的凋亡,假手術(shù)組未見凋亡,與肝總動脈結(jié)扎組相比,APS組及單純梗黃行膽管再通組膽管上皮細胞核凋亡指數(shù)(AI)明顯減低,差異具有統(tǒng)計學意義。
　　3.HAL+膽管再組肝門部膽管壁表現(xiàn)出明顯的急慢性炎癥性改變,膽管上皮細胞排列紊亂,局部缺失嚴重并有大量胞漿空泡樣改變,并可見膽管壁壞死,ASP+膽管再通組炎癥改變明顯減輕,無膽管壁壞死情況。
　　結(jié)論:
　　本實驗采