幾種微生物及其代謝產(chǎn)物的毛細(xì)管電泳方法研究.pdf_第1頁
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1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文幾種微生物及其代謝產(chǎn)物的毛細(xì)管電泳方法研究姓名:何進(jìn)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:喻子牛20031101在線性范圍、分析時(shí)間、重現(xiàn)性、樣品前處理、運(yùn)行費(fèi)用等方面有明顯優(yōu)勢(shì),可以替代現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T9553一1993或作為該方法的補(bǔ)充。DNA一般采用高濃度線性高聚物無膠篩分毛細(xì)管電泳分離。但高濃度篩分介質(zhì)粘度大,電泳操作困難,而使用低濃度的分離介質(zhì)并加入合適的添加劑可以在低粘度下實(shí)現(xiàn)高效分離。本

2、文采用中性涂層毛細(xì)管,以羥丙基甲基纖維素(HPMC)為無膠篩分介質(zhì),篩選了適合的添加劑,優(yōu)化了緩沖液、場(chǎng)強(qiáng)、進(jìn)樣方式等條件。結(jié)果表明,用5g/LHPMC添加10g/L的葡萄糖能很好地分離100~1000bpDNA片段。細(xì)菌的形態(tài)、表面電荷是細(xì)菌的特征,因而不同細(xì)菌在電場(chǎng)中的淌度會(huì)有差異,據(jù)此毛細(xì)管電泳可以用來分離和鑒定細(xì)菌。本文分別對(duì)革蘭氏陽性菌蘇云金芽胞桿菌和革蘭氏陰性菌大腸桿菌的電泳分離條件、樣品處理方式進(jìn)行了探索,初步建立了毛細(xì)管

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