裸花紫珠抗單純皰疹病毒Ⅰ型藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、裸花紫珠Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.為馬鞭草科紫珠屬植物，曾收載于《中國(guó)藥典》1977版一部，功效消炎，解毒，收斂，止血，臨床用于細(xì)菌感染引起的炎癥，急性傳染性肝炎，呼吸道和消化道出血。
　　目的：對(duì)裸花紫珠的抗單純皰疹病毒1型的活性物質(zhì)進(jìn)行追蹤，分離純化并鑒定其抗HSV活性成分，對(duì)分離所得的成分進(jìn)行抗HSV活性確認(rèn)，同時(shí)進(jìn)行抗炎、調(diào)節(jié)免疫的相關(guān)活性研究，闡釋其抗HSV機(jī)理。
　　方法：

2、系統(tǒng)分離法分別制各裸花紫珠石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇部位以及相應(yīng)的敲除部位，采用HSV-1感染的Hep-2細(xì)胞模型，進(jìn)行體外抗HSV-1活性的評(píng)價(jià)，將制備的各部位抗HSV活性與全成分組進(jìn)行比較，確定裸花紫珠體外抗單純皰疹病毒Ⅰ型的活性部位;采用色譜技術(shù)（硅膠柱色譜、中壓快速分離色譜、凝膠色譜、制備HPLC）、重結(jié)晶等手段結(jié)合體外體外抗HSV-1活性的評(píng)價(jià)對(duì)裸花紫珠乙酸乙酯部位進(jìn)行化學(xué)成分研究，采用薄層色譜、核磁和質(zhì)譜等技術(shù)對(duì)所分

3、離的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定;采用HSV-1感染的Hep-2細(xì)胞體外模型對(duì)分離得到的單體進(jìn)行抗HSV活性篩選，應(yīng)用Reed-Muench法計(jì)算活性成分的治療指數(shù)（therapeutic index，TI）;應(yīng)用小鼠脾臟血細(xì)胞原代培養(yǎng)法，研究所得成分對(duì)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖的影響;分離培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞研究所得成分對(duì)體外培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響。
　　結(jié)果：確定了乙酸乙酯部位為其主要抗HSV活性部位，從中分離得到11個(gè)化合物，分別鑒定為

4、(1)熊果酸，(2)齊墩果酸，(3)β-谷甾醇，(4)6，7-二羥基香豆素，(5)阿魏酸，(6)木犀草素，(7)異鼠李素，(8)山奈酚，(9) Acteoside，(10)松果菊苷，(11)木犀草素-7-O-葡萄糖苷。其中化合物8和10為在裸花紫珠中首次發(fā)現(xiàn)。木犀草素和木犀草素-7-O-葡萄糖苷為抗HSV活性成分，其TI分別為23.32和10.53，6，7-二羥基香豆素、阿魏酸、木犀草素和木犀草素-7-O-葡萄糖苷在一定的濃度下可以促進(jìn)

5、脾臟細(xì)胞的增殖，并呈現(xiàn)劑量依賴性;6，7-二羥基香豆素，阿魏酸，木犀草素在體外可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞的細(xì)胞增殖，可以抑制LPS誘導(dǎo)的NO產(chǎn)生，具有一定的抗炎活性。
　　結(jié)論：裸花紫珠在抗HSV方面具有多成分多靶點(diǎn)的特點(diǎn)，其既可以直接抑制病毒，也可以通過(guò)調(diào)節(jié)免疫增強(qiáng)機(jī)體的抗HSV活力，同時(shí)降低機(jī)體炎性因子的釋放，控制病毒對(duì)機(jī)體的損害從而達(dá)到治療病毒性疾病的效果;其中直接抗HSV的的活性成分為木犀草素和木犀草素-7-O-葡萄糖苷，具有免疫調(diào)