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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討神經(jīng)元正五聚蛋白2(Neuronal pentraxin II,NPTX2)基因啟動(dòng)子區(qū)CpG位點(diǎn)甲基化與年齡的關(guān)系。
方法:提取200例活體外周血樣本的基因組DNA,經(jīng)甲基化修飾試劑盒修飾后,利用甲基化特異性-PCR(Methylation specific-PCR,MSP)檢測(cè)其N(xiāo)PTX2基因啟動(dòng)子區(qū)單個(gè)位點(diǎn)甲基化情況,并分析其與性別、年齡的關(guān)系。選取三個(gè)年齡組的60個(gè)樣本,對(duì)其進(jìn)行甲基化特異性的高分辨率熔解曲線
2、法(methylation specific-high resolution melting,MS-HRM)分析,檢測(cè)其啟動(dòng)子區(qū)多個(gè)位點(diǎn)甲基化與年齡的關(guān)系。
結(jié)果:MSP檢測(cè)中以每個(gè)樣本年齡、性別為自變量,是否甲基化為因變量,用二分類(lèi)的logistic回歸分析顯示,是否甲基化與性別因素不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.843),表明性別因素對(duì)NPTX2基因甲基化影響不顯著;而是否甲基化與年齡因素則具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000),表明
3、年齡因素顯著影響該基因的甲基化。以五歲為一個(gè)年齡段,對(duì)其定性情況進(jìn)行線性回歸分析顯示男性(P=0.001),女性(P=0.000),總體(P=0.000)均存在線性關(guān)系,表明甲基化率是隨年齡段的增加而呈線性增長(zhǎng)的。MS-HRM檢測(cè)顯示各年齡段甲基化程度不同,甲基化程度10%以上的比例為1~5歲組40%,31~35歲組50%,61~65歲組65%。
結(jié)論:NPTX2基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化程度隨年齡的增加而增加??蛇M(jìn)一步研究建立回歸模
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