RASGRF1基因的甲基化與癲癇的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：越來(lái)越多的證據(jù)都提示癲癇可能是由表觀遺傳過(guò)程介導(dǎo)。本研究的目的是檢測(cè) KA誘導(dǎo)的急性和慢性的小鼠癲癇模型中的RASGRF1表達(dá)及基因啟動(dòng)子DNA甲基化的狀態(tài)。此外，DNMT抑制劑RG108被用于體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以探討甲基化在癲癇中的可能作用。
　　方法：本研究中利用KA小鼠，采用RT-PCR檢測(cè)基因水平，western blot檢測(cè)蛋白的表達(dá)，免疫熒光檢測(cè)蛋白表達(dá)部位，BSP技術(shù)測(cè)試啟動(dòng)子甲基化情況；側(cè)腦室注射甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑

2、后觀察急性和慢性動(dòng)物行為變化及基因和蛋白質(zhì)表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：RASGRF1表達(dá)逐漸下降并且在慢性期達(dá)到最低水平，它主要表達(dá)于神經(jīng)元而不在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。在KA誘導(dǎo)的小鼠癲癇（1天，10天，45天）的體內(nèi)模型中，我們發(fā)現(xiàn)SE后10天海馬5'區(qū)表現(xiàn)出高甲基化。RG108預(yù)處理后的小鼠中表現(xiàn)出明顯降低癲癇易感性，減少發(fā)作的潛伏期，降低發(fā)作的嚴(yán)重程度；并且能顯著降低自發(fā)性發(fā)作小鼠的百分比。RG108可以抑制由紅藻氨酸誘導(dǎo)RASGRF1