NPTX2基因在胰腺癌中的甲基化異化研究.pdf

1、目的：研究NPTX2基因在胰腺癌中的甲基化水平并評(píng)價(jià)其用于胰腺癌診斷的價(jià)值。 方法：在10例胰腺癌組織和10例癌旁正常胰腺組織中，分別應(yīng)用qRT-PCR和SYBR Green熒光摻入QMSP檢測(cè)NPTX2 mRNA表達(dá)量及CpG島序列的甲基化量。分析甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑5Aza-dC處理胰腺癌細(xì)胞株(PANC-1和ASPCI)前后NPTX2 CpG島序列甲基化修飾和mRNA表達(dá)的差異。同時(shí)，測(cè)序分析NPTX2 CpG島序列的野生型

2、和MSP擴(kuò)增產(chǎn)物序列。應(yīng)用上述建立甲基化定量檢測(cè)方法分析NPTX2甲基化在胰腺癌、慢性胰腺炎及健康志愿者全血和糞DNA中的差異。 結(jié)果：①癌旁正常胰腺組織比胰腺癌組織中的NPTX2基因相對(duì)高表達(dá)(3.526±3.037 vs.0.276±0.263，P=0.001)，甲基化指數(shù)(MI)相對(duì)較低(1.28％±0.98％VS.9.02％±7.52％，P<0.05)。②NPTX2在PANC-1細(xì)胞株中不表達(dá)，而經(jīng)5Aza-dC處理后明

3、顯高表達(dá)；在ASPC1細(xì)胞株中雖有表達(dá)，但處理后表達(dá)量明顯增高。③測(cè)序結(jié)果表明AsPC1胰腺癌細(xì)胞株中NPTX2 CpG島檢測(cè)區(qū)段中存在16個(gè)甲基化異化的CpG位點(diǎn)。④NPTX2基因MI在胰腺癌患者全血DNA中顯著高于健康人(1.80％±1.76％vs.0.84％±0.45％)，而糞便DNA暫且未檢到組間差異，有待擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。 結(jié)論：NPTX2基因的甲基化參與胰腺癌的發(fā)生，檢測(cè)其在臨床樣品中的MI可進(jìn)一步開(kāi)發(fā)應(yīng)用于胰腺