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1、Y89386G分類號(hào):——一密級(jí):——學(xué)號(hào)西北大學(xué)碩士學(xué)位論文題目:揎婁物亟鮑凹£l1二苤基二3:里基:二毗唑嗌酮2街生’業(yè)壁H£豎麴叢△業(yè)I二IQE坌查匠作者:林雪指導(dǎo)教師:賈敬芬專業(yè)技術(shù)職務(wù):教授王仲孚副教授學(xué)科(專業(yè))——答辯日期:20066細(xì)胞生物學(xué)學(xué)位授予日期:二OO六年五月AnImprovedPMP(1PheⅡyl3Methyl5Pyrazolone)PrecolumnDerivatizadonofCarbohydrateM
2、ethodforHPLCAndMALDI—ToFAnalysisAbstractTheimportalltrolesofcarbohy出atesinmanybiologicalpmcesseshavebecomemoreandmorefecognized,thus,|hereareconsiderableinte糟stsincarbohydrateresearchers,ofwhichhi曲一perfomanceliquidchroma
3、toFaphy(HPLC)isanessentialanal)mcaltool_Precol眥derivatizationisuSllallyemployedtoachieveHPLCana王ySiscouplingwithUVor丑uoresccncede£ection,precdmnderiv8tjzationfnethodshaveseveraladVantages,suchashi曲detectionsensnivi吼short
4、timeconsumption,smallquatitiesofsamplereqlliremem,aIldsoOnPMP(1一Phenyl一3一MethyI一5一PyrazoIone)isoneoftherrtostconlmoniyuseddenv砒izationagents,inatypicalderiva翻tionreactionpmcedure,sodiumhydroxides01岫onwasintroducedasalkal
5、inemediumtoinitiatereactionanenⅣardt11eneutraIizationwmlacidwasanecessarystep’foⅡningtoomuchsaIt,whichintcr岔ressubsequentMALDI—MSanalysisalthou曲HPLCs印aration啪wellInt11isp印er’跚monia、vasemployedinsteadofsodi啪hydroxide,d耐va
6、zationfeactiOnwassystematicoptimj乃ed,includingreactiontime,reactiOntemperatureandPMPcons啪mion,hi曲yield啪sachievedThedcrivativeswcreidenti&dbyMALDIMSInaddi曲n,tl:lestabilityofderivalivesandmefidel時(shí)ofderivatizationmemodweree
7、V“uatedTheresuItsmdicatcdthattlismetIodwasquitesuitabIefofmutineaIlalysesofcarbohydrateso缸t1ismethodhasbeensuccessfIlllyappliedtoHPLCan“ysjsofsimplemonosacdlaridesAb雛elineseparationoffivemorlosaccharideswasobtairledunder
8、optimizedisoIationconditionsThenaroutineidentification趾dquantificationmetllodhasbeenestablishedBythism劬od,there“carbohy出ates啪plewaSwellanalyzedFurtllemore,thePMPm舶odwasalsosuccessfhl王yusedforoligosacchaddesandtheglycansr
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