幽門(mén)螺旋桿菌抗原和CTB融合基因在煙草、番茄中的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究分別構(gòu)建了含融合基因CTB-cagA3.4、CTB-Linker-ureB和CTB-Linker-cagA1.8的植物表達(dá)載體，采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤(pán)轉(zhuǎn)化法，將融合基因轉(zhuǎn)入煙草和番茄中，以期獲得同時(shí)表達(dá)HpCagA蛋白或UreB蛋白和粘膜佐劑CTB的轉(zhuǎn)基因植株，為研制防治人類(lèi)Hp感染的有效和安全的功能性食品奠定基礎(chǔ)。同時(shí)優(yōu)化番茄的轉(zhuǎn)化體系，為建立以煙草和番茄作為生物反應(yīng)器來(lái)表達(dá)微生物抗原奠定了技術(shù)平臺(tái)?！　⊥ㄟ^(guò)兩年多的實(shí)驗(yàn)，獲得了

2、以下結(jié)果：(1)構(gòu)建能在煙草和番茄基因組中高效表達(dá)的含外源融合基因的植物表達(dá)載體p13-CC1N、p23-35SCLUN、p23-35SCLCN和p121-CLUN，由CaMV35S啟動(dòng)子啟動(dòng)，PCR分析、酶切鑒定及DNA序列測(cè)定驗(yàn)證結(jié)果正確后將質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌EHA105或GV3101中。(2)構(gòu)建原核表達(dá)載體pET28a-CLU，轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL-21(DE3)中，ITPG誘導(dǎo)表達(dá)，以檢測(cè)融合蛋白的原核表達(dá)情況；(3)利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的

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