不同區(qū)域鐵皮石斛成分差異分析與指紋圖譜建立研究.pdf

1、鐵皮石斛（Dendrobium officinale Kiumra et Migo）是我國傳統(tǒng)中草藥，目前主要以莖入藥，為加強鐵皮石斛藥材資源的綜合利用與質量控制，本研究以高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜、氣相色譜/質譜(GC-MS)結合多指標成分定量分析的方法，對不同產地、不同部位、不同生長時期的鐵皮石斛有效成分進行了綜合系統(tǒng)的評價，同時建立了鐵皮石斛的標準指紋圖譜。
　　本研究主要內容包括：⑴采用頂空固相微萃取技術(HS-SP

2、ME)高效提取鐵皮石斛花、莖、葉中的揮發(fā)性成分，并以GC-MS技術測定各化合物，根據(jù)NIST11質譜數(shù)據(jù)庫的檢索匹配結果并結合保留指數(shù)RIs，共鑒定得到37種化合物，分為七大類:烷烴類、烯烴類、醛類、醇類、酮類、酯類化合物及其他，其中花中有30種化合物，葉中18種，莖中11種。鐵皮石斛花、莖、葉中有7種共有的化合物，分別為:十一烷、反-2-辛烯醛、長葉烯、β-紫羅蘭酮、壬醛、癸醛和香葉基丙酮。從揮發(fā)性成分種類分析，發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛葉中成分種

3、類豐富，β-紫羅蘭酮、香葉基丙酮、β-環(huán)檸檬醛、壬醛和癸醛這幾類主要成分的含量較高，表明了鐵皮石斛葉片在揮發(fā)性成分上具有較大的研究利用價值。比較了安徽霍山、浙江德清、浙江磐安、浙江永康這四個產地的鐵皮石斛葉中揮發(fā)性成分，安徽霍山的鐵皮石斛葉片共有22種成分，種類最為豐富。其次為浙江磐安，共有21種成分，浙江德清含有20種成分，浙江永康含有18種成分。四個產地的鐵皮石斛葉片共有14種共有的揮發(fā)性成分。⑵建立了鐵皮石斛HPLC指紋圖譜研究的

4、方法。結果顯示葉中化合物種類和含量都明顯高于莖，這說明鐵皮石斛葉具有較高的研究價值。在此基礎上，對7個產地（云南德宏、江西鷹潭、安徽霍山、浙江德清、浙江磐安、浙江永康、浙江麗水）11個批次的鐵皮石斛樣品的甲醇提取物進行成分研究及比較，建立了11個批次鐵皮石斛葉片有效成分的指紋圖譜體系。共獲得21個共有色譜峰，并以其峰面積計算各產地鐵皮石斛樣品的相似性，浙江德清兩個批次樣品與對照圖譜相似性較低，分別為0.639和0.654，其余六個產地的

5、樣品與對照圖譜相似性較高，在0.816～0.954之間。聚類分析結果顯示，云南德宏的鐵皮石斛被單獨聚為一類，安徽霍山和浙江磐安聚為一類，浙江其余三個產地和江西鷹潭聚為一類。此外，通過主成分分析得到累積貢獻率達70.583％的三個主成分，其中峰8、9、10、14、15、16對主成分1貢獻率較高，峰1、2、4、5、20對主成分2貢獻率較高，峰11、12、13對主成分3貢獻率較高。鐵皮石斛葉和莖的甲醇提取物均有一定的抗氧化活性，且葉的抗氧化活

6、性高于莖。⑶對不同部位、不同產地的鐵皮石斛黃酮、多糖、生物堿含量進行比較，結果發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛葉中的黃酮含量明顯高于莖，不同產地之間，浙江永康的鐵皮石斛的總黃酮含量明顯高于其他產地，其次為安徽霍山和云南德宏。鐵皮石斛莖的多糖含量明顯高于葉，不同產地之間，浙江德清鐵皮石斛的總多糖含量最高，為51.453％。鐵皮石斛生物堿含量明顯低于黃酮和多糖，并且在葉中含量明顯高于莖，不同產地之間，浙江磐安的鐵皮石斛總生物堿含量最高，為0.0575％。鐵皮石