厚樸揮發(fā)性成分的HS-SPME-GC指紋圖譜建立.pdf

1、厚樸(Magnolise officinslis Cortex)為木蘭科植物厚樸(Magnoliaofficinalis Rehd.et Wils.)及凹葉厚樸(Magnolia officinalis Rehd.etWils.var.biloba Rehd.et Wils.)的干燥干皮、枝皮和根皮。本課題以厚樸為研究對象，采集和購買了多批不同產(chǎn)地或部位的厚樸藥材共15批，采用頂空-固相微萃取-氣相色譜法(HS-SPME-GC)對其成分

2、進(jìn)行分析，并結(jié)合頂空-固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜(HS-SPME-GC-MS)的鑒定結(jié)果，建立其中藥色譜指紋圖譜。通過聚類分析、相似度分析的結(jié)果對其品質(zhì)進(jìn)行評價。同時為了比較不同方法及不同化學(xué)模式之間的異同，采用高效液相色譜法(HPLC)獲取反映不同批次厚樸化學(xué)本質(zhì)差異的數(shù)量化特征，為厚樸的質(zhì)量控制提供科學(xué)的、系統(tǒng)的評價依據(jù)。
　　 1.對HS-SPME-GC法分析厚樸揮發(fā)性成分的萃取條件和色譜條件進(jìn)行優(yōu)化。通過考察不同條件下出

3、峰個數(shù)和總峰面積的變化差異，對不同涂層的SPME商用萃取頭、萃取溫度、萃取時間和樣品用量等影響因素進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明：采用PDMS/DVB萃取頭，取厚樸粉末0.2g在70℃恒溫條件下萃取60min，可達(dá)到較好的萃取效率；同時也對色譜柱、升溫程序、流速、分流比等分離因素進(jìn)行了條件優(yōu)化，篩選出HP-50毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm×0.25μm)，程序升溫：50℃(1min)，以4℃/min上升到140℃(2min)，以2℃/min上

4、升到180℃，以12℃/min上升到280℃(5 min)，流速1.3 ml/min，分流比為15:1的色譜條件較適合建立厚樸藥材的中藥色譜指紋圖譜。
　　 2.按上述優(yōu)化條件對不同產(chǎn)地或不同部位的15批厚樸藥材進(jìn)行批量分析，共獲得42個共有色譜峰，并經(jīng)HS-SPME-GC-MS鑒定確認(rèn)了15個組分。以喇叭茶醇為內(nèi)參照峰，建立指紋圖譜。通過聚類分析，15批次藥材被分成4類。其中1、2類為推薦品，選取其中10個批次建立共有模式，并

5、計(jì)算生成的對照圖譜與15個批次之間的相似度，結(jié)果表明各批次的相似度均在0.9以上，未發(fā)現(xiàn)離群樣品，而其中11號批次因保存不當(dāng)導(dǎo)致?lián)]發(fā)性成分流失，其聚類結(jié)果在第四類、相似度在15個批次中最低，與實(shí)際情況相符，所以本研究所采用的HS-SPME方法適合于中藥材GC指紋圖譜的建立。
　　 3.對21個批次厚樸的主要藥效成分厚樸酚和和厚樸酚進(jìn)行比較分析，建立其共有模式，以厚樸酚、和厚樸酚為考察指標(biāo)，用系統(tǒng)聚類分析對其進(jìn)行化學(xué)模式識別研究。