MNNG對(duì)壇紫菜葉狀體細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的影響與壇紫菜突變品系間的差異蛋白質(zhì)研究.pdf

1、紫菜因其具有高營(yíng)養(yǎng)和高附加值而受到人們的廣泛喜愛(ài)。在我國(guó)一些沿海省份，人工栽培紫菜已成為一項(xiàng)重要的產(chǎn)業(yè)，紫菜的育種也因此倍受重視。 本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用化學(xué)誘變劑MNNG(N-甲基-N'-硝基-N-亞硝基胍)處理壇紫菜葉狀體細(xì)胞，觀察不同濃度的誘變劑對(duì)體細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的影響。結(jié)果顯示：MNNG(7.5～120.0μg/mL)對(duì)壇紫菜葉狀體細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，而且隨濃度的變化，對(duì)壇紫菜葉狀體細(xì)胞后期的發(fā)育分化方向有不同的影響。7.5μ

2、g/mL、15.0μg/mL誘變處理組多向畸形細(xì)胞團(tuán)和絲狀體發(fā)育；30.0μg/mL和60.0μg/mL誘變處理組向團(tuán)型葉狀體發(fā)育；高濃度誘變處理組后期正常型葉狀體比例較高。同時(shí)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)一種與條斑紫菜單孢子結(jié)構(gòu)、功能相似的類(lèi)單孢子細(xì)胞。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)優(yōu)化壇紫菜蛋白質(zhì)提取方法和雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳，建立了壇紫菜蛋白質(zhì)組技術(shù)方案。利用建立的方案，對(duì)葉狀體藻體厚度性狀明顯差異的壇紫菜突變品系NO.2與NO.9的葉狀體細(xì)胞蛋

3、白質(zhì)組進(jìn)行了差異比較分析。發(fā)現(xiàn)NO.9組較NO.2組新增4個(gè)蛋白亞基斑點(diǎn)，2個(gè)蛋白亞基斑點(diǎn)表達(dá)量較NO.2組提高，2個(gè)蛋白亞基斑點(diǎn)表達(dá)量較NO.2組降低。對(duì)這8個(gè)差異蛋白亞基斑點(diǎn)進(jìn)行肽片段指紋圖譜分析，經(jīng)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，鑒定出一個(gè)蛋白斑點(diǎn)為1，5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RubisCO)小亞基，數(shù)據(jù)庫(kù)結(jié)構(gòu)來(lái)源于壇紫菜。RubisCO存在于高等植物和自養(yǎng)細(xì)菌中，是所有光合生物進(jìn)行光合碳同化的關(guān)鍵性酶。它參與了光合作用和光呼吸過(guò)程，調(diào)節(jié)兩者