慢性應(yīng)激影響大鼠情緒和認(rèn)知且抑制海馬及額葉FGF2、FGFR1蛋白表達(dá).pdf

1、目的：一些臨床研究和基礎(chǔ)研究表明,慢性應(yīng)激與情緒和認(rèn)知等高級(jí)心理過(guò)程密切相關(guān),可能導(dǎo)致機(jī)體情緒調(diào)節(jié)障礙和認(rèn)知功能損害,引起機(jī)體對(duì)各種心理和精神疾病的易感性提高。海馬和額葉是與情緒和認(rèn)知過(guò)程聯(lián)系密切的腦區(qū),參與完結(jié)刺激下產(chǎn)生情緒變化的過(guò)程以及信息獲得、加工、保持和提取等認(rèn)知過(guò)程。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)神經(jīng)元的發(fā)生、生長(zhǎng)、存活、分化及突觸可塑性等具有促進(jìn)作用,目前正成為與心理和精神疾病以及神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變有關(guān)的研究熱點(diǎn)。本研究通過(guò)建立動(dòng)物模

2、型,探索慢性應(yīng)激對(duì)情緒調(diào)節(jié)和認(rèn)知功能的影響;檢驗(yàn)神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)分子信號(hào)FGF2、FGFR1在慢性應(yīng)激作用下發(fā)生的改變;并分析行為變化與蛋白表達(dá)改變之間的聯(lián)系,進(jìn)一步探討慢性應(yīng)激條件下,情緒和認(rèn)知改變的機(jī)制問(wèn)題。
　　 方法：雄性Sprague-Dawley大鼠16只,隨機(jī)分為對(duì)照組和慢性應(yīng)激組,采用慢性不可預(yù)見(jiàn)溫和應(yīng)激(CUMS)方法建立大鼠慢性應(yīng)激模型。情緒調(diào)節(jié)功能的檢測(cè)采取糖水偏好實(shí)驗(yàn)和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn),主要考察動(dòng)物快感缺乏程度、焦慮水

3、平、活動(dòng)能力和活躍程度等行為指標(biāo)是否在慢性應(yīng)激作用下發(fā)生改變。認(rèn)知功能通過(guò)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)和Y迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè),探討動(dòng)物空間線索信息的獲得、保持和提取以及對(duì)逃避條件反射的學(xué)習(xí)和記憶能力是否受慢性應(yīng)激的影響。行為實(shí)驗(yàn)后,進(jìn)一步研究FGF2、FGFR1兩種蛋白表達(dá)在海馬和額葉中的變化情況,采用Western blotting方法,檢測(cè)海馬和額葉皮質(zhì)中FGF2、FGFR1蛋白總量的改變,海馬各部位和額葉皮質(zhì)具體位置中蛋白表達(dá)分布情況采用

4、免疫組織化學(xué)方法檢驗(yàn)。最后對(duì)行為數(shù)據(jù)和海馬及額葉中蛋白表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性研究,進(jìn)一步探討慢性應(yīng)激引起的情緒和認(rèn)知的變化與海馬及額葉功能的聯(lián)系,以及與這兩部分腦組織中FGF2、FGFR1蛋白表達(dá)變化的聯(lián)系。
　　 結(jié)果：
　　 (1)從多種行為實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可知,慢性應(yīng)激造成大鼠情緒調(diào)節(jié)障礙和認(rèn)知功能損傷。首先,與對(duì)照組相比,慢性應(yīng)激組大鼠在總液體消耗無(wú)差異的前提下,對(duì)糖水的偏好降低,表明其出現(xiàn)顯著的快感缺乏情緒表現(xiàn);曠場(chǎng)中央

5、格停留時(shí)間百分比增加,行進(jìn)距離減少,站立次數(shù)減少,表明慢性應(yīng)激組大鼠出現(xiàn)顯著的焦慮情緒、活動(dòng)能力下降以及活躍程序下降。然后,從慢性應(yīng)激組大鼠Morris水迷宮訓(xùn)練平均潛伏期增加,測(cè)試中穿越平臺(tái)次數(shù)減少的結(jié)果可知慢性應(yīng)激損害了大鼠空間線索的學(xué)習(xí)和記憶能力:Y迷宮第一天學(xué)習(xí)次數(shù)增加,第二天測(cè)試正確率下降,表明慢性應(yīng)激組大鼠對(duì)逃避條件反射的學(xué)習(xí)和記憶能力下降。
　　 (2)慢性應(yīng)激引起FGF2、FGFR1兩種蛋白在海馬和額葉中的表達(dá)下

6、調(diào)。Westernblotting結(jié)果為海馬部位FGF2、FGFR1蛋白表達(dá)下調(diào);額葉中變化趨勢(shì)相同。免疫組織化學(xué)方法得出結(jié)果為FGF2、FGFR1蛋自在海馬CA1、CA3去錐體細(xì)胞附近以及DG區(qū)顆粒細(xì)胞層區(qū)域表達(dá)下調(diào);FGF2、FGFR1蛋白在額葉皮質(zhì)錐體神經(jīng)元胞體周?chē)磉_(dá)下調(diào)。
　　 (3)對(duì)反映情緒調(diào)節(jié)和認(rèn)知能力的行為數(shù)據(jù)與反映蛋白表達(dá)的Western blotting數(shù)據(jù)和免疫組織化學(xué)檢測(cè)數(shù)據(jù)之間進(jìn)行相關(guān)分析,結(jié)果顯示:

7、糖水消耗與海馬CA3區(qū)FGF2蛋白表達(dá)相關(guān)顯著,與額葉FGFR1蛋白相關(guān)顯著。曠場(chǎng)中央格停留時(shí)間與額葉FGF2、FGFR1表達(dá)相關(guān)顯著;曠場(chǎng)行進(jìn)距離與海馬CA3、DG區(qū)FGFR1蛋白表達(dá)相關(guān)顯著;站立次數(shù)與額葉FGF2、FGFR1蛋白表達(dá)相關(guān)顯著。水迷宮訓(xùn)練潛伏期與海馬CA3、DG區(qū)FGF2蛋白相關(guān)顯著,而與CA1、CA3、DG區(qū)FGFR1蛋白相關(guān)顯著;測(cè)試穿越平臺(tái)次數(shù)海馬FGF2以及額葉FGF2、FGFR1蛋白表達(dá)相關(guān)顯著。Y迷宮學(xué)習(xí)

8、次數(shù)與海馬CA1區(qū)FGF2蛋白表達(dá)相關(guān)顯著;正確率與額葉FGF2、FGFR1蛋白表達(dá)相關(guān)顯著。
　　 結(jié)論：慢性應(yīng)激引發(fā)大鼠情緒調(diào)節(jié)障礙和認(rèn)知功能障礙,引起海馬和額葉FGF2、FGFR1蛋白表達(dá)下調(diào),提示FGF家族的這兩個(gè)重要成員蛋白在海馬和額葉中表達(dá),參與慢性應(yīng)激影響心理機(jī)能的過(guò)程。這些結(jié)果為進(jìn)一步探明慢性應(yīng)激引發(fā)身心疾病的機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)證據(jù),并提示FGF2、FGFR1蛋白可能是對(duì)慢性應(yīng)激引起的身心疾病具有診斷和治療價(jià)值的分子