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1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文慢性應(yīng)激抑郁癥大鼠海馬中cjun的表達(dá)姓名:滿力申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):應(yīng)用心理學(xué)指導(dǎo)教師:金魁和200403012主要試劑兔抗大鼠cjtm多克隆抗體,生物素標(biāo)記的山羊抗兔IgG,SABC免疫組化試劑盒,DAB顯色劑,均購于Boster公司。實驗儀器YSD一4G型藥理生理實驗多用儀(安徽蚌埠醫(yī)學(xué)院無線電二廠);MetaMorph/CoolSnaph/Ax70計算機圖像分析系統(tǒng)。二、實驗方法1動物分組將實驗大鼠適應(yīng)
2、環(huán)境飼養(yǎng)1周,稱重,并采用Open—field法(開場實驗)測定其行為。然后隨機分為急性應(yīng)激組(A組)和抑郁模型組(c組),每組各18只。兩組大鼠在體重和曠場行為分析中各指標(biāo)均元顯著差異。2應(yīng)激過程急性應(yīng)激組(A組)試驗第1ql天不給與任何刺激,籠養(yǎng),每籠6只。慢性應(yīng)激組(c組)大鼠單籠喂養(yǎng),每籠1只。試驗第1—2l天內(nèi)接受7種不同的刺激:電擊足底、冰水游泳、搖晃、熱應(yīng)激、夾尾、禁水、禁食。每天給與一種刺激,各種刺激累計使用2—3次。第
3、21天末,兩組大鼠再次進(jìn)行open—field(開場行為)評分。第22天將兩組大鼠冰水強迫游泳5rain。3灌流取材與切片所有實驗大鼠在第22天游泳應(yīng)激后第0min、30rain、1h、3h、5h、8h等不同時間各隨機選取3只,用戊巴比妥鈉行腹腔麻醉后,經(jīng)左心室快速注入37。C生理鹽水200rrd,繼之灌入4qC的4%多聚甲醛溶液300ml,然后剝離腦,修塊,后固定48小時以上,梯度乙醇脫水,石蠟包理后,行冠狀切片。4JUN蛋白免疫組化
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