肌球蛋白X在側腦室前下區(qū)成神經細胞遷移中作用的研究.pdf

1、側腦室前下區(qū)（anteriorsubventrieularzone，SVZa）是大腦中神經干細胞數量較多的區(qū)域之一，該區(qū)域神經干細胞產生的成神經細胞是最具特色的細胞群，它們自產生起即具備發(fā)育成神經細胞的潛能，但在遷移至嗅球的過程中始終保持向神經細胞分化的潛能而不進一步分化，直到遷移至目的地后才分化為成熟的神經細胞，因此，SVZa成神經細胞是研究神經細胞發(fā)育及遷移的較佳模型。肌球蛋白X（MyosinX）是脊椎動物所特有的細胞骨架蛋白，在腦

2、、腎、肝等大多數組織中都有表達，它的顯著特點是定位于細胞絲足的頂端和片狀偽足的邊緣，MyosinX作為一個動力蛋白分子，起到連接細胞膜蛋白與細胞內骨架蛋白的橋梁作用，推測它可能在SVZa成神經細胞的遷移過程中起到重要作用。 通過對新生大鼠腦切片進行免疫組化，觀察SVZa及其成神經細胞遷移至嗅球的喙狀遷移流區(qū)域（rostralmigratorystream，RMS）MyosinX的表達與分布，在獲得MyosinX在RMS區(qū)域高表達

3、的基礎上，建立新生大鼠嗅球RMS區(qū)域外植體培養(yǎng)體系，通過Matrigel和Collagen不同比例的膠原混合物，優(yōu)化外植體培養(yǎng)條件。進一步，分離RMS區(qū)域的成神經細胞，利用構建的GFP融合表達載體MyosinX—siRNA和scramblesiRVA轉染分離后的成神經細胞，懸滴法培養(yǎng)成團，模擬體外外植體包埋培養(yǎng)，24小時后，表達scramblesiRNA的成神經細胞大量從細胞團中遷移出來，而表達MyosinX—siRNA的成神經細胞遷移