海洋適冷蛋白酶產(chǎn)生菌的篩選、酶的分離純化及適冷機制研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文海洋適冷蛋白酶產(chǎn)生菌的篩選、酶的分離純化及適冷機制研究姓名：陳秀蘭申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：高培基2002.5.1墮重蘭坐查查蘭苧主蘭壘蘭壅————————————一菌株鐾簍鐾蘭蘭竺竺 菌株 長溫度 酶溫度 適溫塞 蘭! 竺! ! 蘭：蘭P ．s p ．S M 9 9 1 3 1 5 “ C 1 0 “ C 3 5 “ C 適冷性最好、對熱最敏感P ．s p ．S M 9 9 1 5 2 0 “ 1

2、2 1 5 4 C 4 0 “ 1 2 適冷性較好，對熱較敏感! 堅! ! 箜 壟。旦 墊蘭 墊．旦 望堡絲董：塑墊至墼壁一塞明：生適壟低洹巫撞主丕囿的苴掛壓主兇蛋自酶盟低漁艘適廑壁星丕回曲11 ．3 適冷菌P s e u d o m o n a ss p ．S M 9 9 1 3 在低溫下生長速率較高，所產(chǎn)蛋白酶為典型的適冷蛋白酶，在低溫下催化效率高。實驗結(jié)果表明顯直直掛查低迢工煎生益速室塑握掛酶查低溫王筮奩的焦絲夔窒豆能是透獫菌旦￡

3、g 應(yīng)盥Q 盥￡墅：墨叢窆2 1 2 適廛低濕的匱釜途疊：戶百，一～2 、P s e u d o m o n a ss p ．S M 9 9 1 3 和P s e u d o m o n a ss p ．S M 9 9 1 5 分泌的蛋白酶的分離純化及性質(zhì)研究．對P s e u d o m o n a s s p ．S M 9 9 1 5 和P ．s p ．S M 9 9 1 3 菌。結(jié)果表明P ．s p ．S M 9 9 1 5 菌株

4、至少分泌三種蛋白酶。這三種蛋白酶的最適酶活溫度有所不同，分別為4 0 ℃、4 0 ℃、4 5 “ C ，并且，這三種蛋白酶的熱穩(wěn)定性也有所差別。P s e u d o m o n a ss p ．S M 9 9 1 3 至少分泌兩種蛋白酶，分別命名為M C P ．0 1 和M C P ．0 2 。蛋白酶M C P - 0 1 的最適酶活溫度為3 0 , - , 3 5 “ 1 2 ，比一般的中溫蛋白酶低2 0 “ ( 2 左右，酶的適冷

5、性很好，同時對熱非常敏感，是典型的適冷酶。而M C P - 0 2 最適酶活溫度為5 0 - - 5 5 ℃，對冷的適應(yīng)性較差，對熟比較穩(wěn)定，已經(jīng)接近中溫蛋白酶。表明：二仝瑩拯查透撿進化過程生：雖直數(shù)量自醛婁差丕星回生進化：互能= 疊適撿醛酸在查墾亙遺星苴拯適獫低溫丕縫生查毆盎墓工e2 ．1 蛋白酶M C P ．0 1 是一分子量為6 0 ．7 K D a ，等電點為3 ．0 左右的酸性蛋白質(zhì)。抑制劑實驗表明蛋白酶M C P ．O l