銀杏葉提取物EGb761對(duì)大鼠脊髓損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本研究通過手術(shù)建立大鼠脊髓損傷動(dòng)物模型，并于脊髓損傷早期全身應(yīng)用銀杏葉提取物(EGb761)。在術(shù)后不同的時(shí)間點(diǎn)對(duì)傷區(qū)脊髓組織中誘生型一氧化氮合酶(iNOS)，白介素-10，超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)陽性表達(dá)物進(jìn)行檢測，并通過行為學(xué)評(píng)分，評(píng)估神經(jīng)功能恢復(fù)狀況，觀察EGb761對(duì)脊髓損傷后神經(jīng)恢復(fù)的影響;并對(duì)其神經(jīng)保護(hù)的可能機(jī)制加以探討，為臨床應(yīng)用EGb761治療脊髓損傷提供初步的理論依據(jù)。
　　 方法:

2、先采用改良Allen打擊法建立T9脊髓中度急性損傷模型，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以4％戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉后，按照改良Allen法，暴露T9節(jié)段，將5g重物通過立體固定儀于10cm高度垂直打擊該節(jié)段背側(cè)正中，制作急性脊髓損傷模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為正常對(duì)照組（N組），損傷組（T組），甲基強(qiáng)的松龍治療組(MP組)和銀杏葉治療組(EGb761)組。對(duì)照組為僅暴露大鼠脊髓組;損傷組為打擊術(shù)后未注射藥物組;MP組于脊髓損傷后30min內(nèi)，由

3、腹腔注入MP(30mg/kg);EGb761組為術(shù)后腹腔給予EGb7611.0ml·kg-1·d-1。分別于傷后1d，3d，5d，7d及14d，進(jìn)行斜板試驗(yàn)與BBB行為學(xué)評(píng)分，觀察大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)情況，同時(shí)處死取材，取傷區(qū)脊髓組織行光鏡組織學(xué)觀察，HE染色觀察脊髓大體組織結(jié)構(gòu)變化;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法測定脊髓組織中IL-10的含量。分別用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸(TBA)法測定脊髓組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性和

4、丙二醛(MDA)含量。TUNEL法標(biāo)記細(xì)胞凋亡，免疫組化方法檢測誘生型一氧化氮合酶(iNOS)的表達(dá)。
　　 結(jié)果:1.與損傷對(duì)照組比較，MP治療組及EGb761治療組大鼠術(shù)后7d和14d臨界角度顯著增加、BBB評(píng)分顯著升高、大鼠脊髓組織中IL-10的含量顯著增高。HE染色顯示，損傷對(duì)照組脊髓組織發(fā)生出血、水腫、壞死、軸突脫髓鞘改變以及炎癥細(xì)胞浸潤和膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)，MP治療組及EGb761治療組術(shù)后7d脊髓組織水腫、炎癥反應(yīng)減輕，

5、神經(jīng)元變性壞死不明顯。2.術(shù)后4h、8h、24hEGb761治療組SOD活性及MDA含量與損傷對(duì)照組比較均有顯著差異(P＜0.01)。術(shù)后各時(shí)相點(diǎn)EGb761治療組神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)和iNOS表達(dá)陽性細(xì)胞率均低于損傷對(duì)照組（P＜0.01或P＜0.05）。
　　 結(jié)論:EGb761能減輕受傷脊髓的繼發(fā)性損傷，對(duì)大鼠脊髓損傷后神經(jīng)損傷恢復(fù)具有促進(jìn)作用。EGb761能抑制脊髓損傷后的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減輕神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，其機(jī)制可能與抑制i