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文檔簡介
1、目的:本研究通過手術建立大鼠脊髓損傷動物模型,并于脊髓損傷早期全身應用銀杏葉提取物(EGb761)。在術后不同的時間點對傷區(qū)脊髓組織中誘生型一氧化氮合酶(iNOS),白介素-10,超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)陽性表達物進行檢測,并通過行為學評分,評估神經(jīng)功能恢復狀況,觀察EGb761對脊髓損傷后神經(jīng)恢復的影響;并對其神經(jīng)保護的可能機制加以探討,為臨床應用EGb761治療脊髓損傷提供初步的理論依據(jù)。
方法:
2、先采用改良Allen打擊法建立T9脊髓中度急性損傷模型,將實驗動物以4%戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉后,按照改良Allen法,暴露T9節(jié)段,將5g重物通過立體固定儀于10cm高度垂直打擊該節(jié)段背側正中,制作急性脊髓損傷模型。實驗動物隨機分為正常對照組(N組),損傷組(T組),甲基強的松龍治療組(MP組)和銀杏葉治療組(EGb761)組。對照組為僅暴露大鼠脊髓組;損傷組為打擊術后未注射藥物組;MP組于脊髓損傷后30min內(nèi),由
3、腹腔注入MP(30mg/kg);EGb761組為術后腹腔給予EGb7611.0ml·kg-1·d-1。分別于傷后1d,3d,5d,7d及14d,進行斜板試驗與BBB行為學評分,觀察大鼠神經(jīng)功能恢復情況,同時處死取材,取傷區(qū)脊髓組織行光鏡組織學觀察,HE染色觀察脊髓大體組織結構變化;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法測定脊髓組織中IL-10的含量。分別用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸(TBA)法測定脊髓組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性和
4、丙二醛(MDA)含量。TUNEL法標記細胞凋亡,免疫組化方法檢測誘生型一氧化氮合酶(iNOS)的表達。
結果:1.與損傷對照組比較,MP治療組及EGb761治療組大鼠術后7d和14d臨界角度顯著增加、BBB評分顯著升高、大鼠脊髓組織中IL-10的含量顯著增高。HE染色顯示,損傷對照組脊髓組織發(fā)生出血、水腫、壞死、軸突脫髓鞘改變以及炎癥細胞浸潤和膠質(zhì)細胞反應,MP治療組及EGb761治療組術后7d脊髓組織水腫、炎癥反應減輕,
5、神經(jīng)元變性壞死不明顯。2.術后4h、8h、24hEGb761治療組SOD活性及MDA含量與損傷對照組比較均有顯著差異(P<0.01)。術后各時相點EGb761治療組神經(jīng)細胞凋亡指數(shù)和iNOS表達陽性細胞率均低于損傷對照組(P<0.01或P<0.05)。
結論:EGb761能減輕受傷脊髓的繼發(fā)性損傷,對大鼠脊髓損傷后神經(jīng)損傷恢復具有促進作用。EGb761能抑制脊髓損傷后的脂質(zhì)過氧化反應,減輕神經(jīng)細胞的凋亡,其機制可能與抑制i
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