黃波羅組織培養(yǎng)及愈傷組織中小檗堿代謝調(diào)控的研究.pdf

1、本試驗(yàn)在黃波羅種源調(diào)查的基礎(chǔ)上，以帶嶺種源小檗堿含量最高的單株種子做為初始材料進(jìn)行黃波羅的快繁和愈傷組織培養(yǎng)的研究，并對(duì)不同培養(yǎng)條件下愈傷組織中小檗堿的含量進(jìn)行了測(cè)定。得出結(jié)果如下： 1．愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)：比較了MS、WPM、NT、IS、B5五種基本培養(yǎng)基，發(fā)現(xiàn)高鹽MS培養(yǎng)基適合于黃波羅愈傷組織的誘導(dǎo)；生長素2,4-D、NAA均對(duì)黃波羅愈傷組織誘導(dǎo)有較大的促進(jìn)作用；配合使用適量的細(xì)胞分裂素6-BA時(shí)效果更好，高濃度生長素則對(duì)誘

2、導(dǎo)有抑制作用。外植體在MS基本培養(yǎng)基+0.3 mg·L-16-BA+2.0 mg/LNAA培養(yǎng)基中誘導(dǎo)效果最好，愈傷組織誘導(dǎo)率在90％以上，且此條件下誘導(dǎo)出得愈傷組織質(zhì)地緊密，表面具有光澤，生長旺盛，適合于繼代培養(yǎng)。愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)最適pH值為6.3；最適蔗糖濃度為20 g·L<'-1>；接種方式以0.7 cm長度橫放在培養(yǎng)基表面效果最好。 2．愈傷組織的繼代培養(yǎng)：繼代培養(yǎng)以MS為基本培養(yǎng)基時(shí)，愈傷組織褐化嚴(yán)重，最適基本培養(yǎng)基為

3、NT培養(yǎng)基。單獨(dú)使用NAA時(shí)，以1.0 mg/L效果最好；配合使用6．BA時(shí)，以0.3 mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA誘導(dǎo)效果最好。此條件下，愈傷組織生長率達(dá)392％，且愈傷組織生長量明顯大于前者。 3．小檗堿愈傷組織代謝培養(yǎng)體系的建立：NT培養(yǎng)基添加0.3mg/L 6-BA+1.0mg/LNAA，pH值6.3左右，蔗糖濃度20g·L<'-1>，培養(yǎng)3周其含量達(dá)到最大，繼代培養(yǎng)4代后小檗堿含量最高，達(dá)干重的2.14％。