愈傷組織制作實(shí)驗(yàn)_第1頁(yè)
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1、1摘要水稻成熟種子具有細(xì)胞全能性。本實(shí)驗(yàn)以24D為基本培養(yǎng)基,添加NAA和6BA為分化培養(yǎng)基,對(duì)水稻種子材料進(jìn)行體外培養(yǎng),誘導(dǎo)形成愈傷組織,并進(jìn)行分化。在培養(yǎng)基中添加一定量的激素給種子形成愈傷組織提供動(dòng)力。結(jié)果表明,在合適的培養(yǎng)條件下愈傷組織的分化程度很高,但培養(yǎng)基因素或光照條件使得褐化現(xiàn)象嚴(yán)重。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞水稻成熟種子組織培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)分化激素1前言前言3三角瓶:50ml2(無(wú)菌),1000ml1槍形鑷:4無(wú)菌濾紙:(10cm10c

2、m)52.3試劑及培養(yǎng)基試劑及培養(yǎng)基2.3.1試劑試劑75%酒精,2%NaCLO,無(wú)菌水(每組1瓶400ml)2.3.2培養(yǎng)基培養(yǎng)基1、誘導(dǎo)培養(yǎng)基:N624D2mg1蔗糖30gl瓊脂8gl2、分化培養(yǎng)基:N6CuSO45H2O1.25mglBA2mglNAA1mgl蔗糖30gl瓊脂8gl3實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟3.1接種室、培養(yǎng)基及用具表面消毒接種室、培養(yǎng)基及用具表面消毒用75%酒精棉球試擦超凈工作、鑷子,將培養(yǎng)基及用具放工作臺(tái),打開紫外燈,

3、照射20分鐘以表面消毒。之后關(guān)紫外燈,打開工作臺(tái)風(fēng)機(jī),通風(fēng)30分鐘后可進(jìn)行無(wú)菌操作。3.2消毒劑的配制消毒劑的配制3.2.175%酒精:每組配95ml。量取95%酒精75ml,加蒸餾水至95ml即可.3.2.22%NaCLO:每組配100ml.0.5%100yX=(ml)x:應(yīng)吸取的NaCLO原液的毫升數(shù);y:NaCLO原液的有效氯濃度。3.3種子去殼種子去殼用自制的脫殼砂紙脫去谷殼,注意保持胚完整。每人準(zhǔn)備30粒去殼種子。3.4外植體

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