熱休克反應時糖皮質激素受體mRNA減少機理的探討.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、已報道,機體及培養(yǎng)細胞在熱休克反應時糖皮質激素受體(Glucocorticoid receptor, GR)減少,GRmRNA也減少,但對GRmRNA減少的機理尚未進行詳細的研究.此外,人肝癌SMMC-7721細胞中GR的含量是正常人體細胞的十幾倍.該實驗也觀察到,SMMC-7721細胞中GR的含量是骨肉瘤HOS-8603細胞的兩倍以上.因此SMMC-7721細胞是探討熱休克反應時GR mRNA減少機理的一種較好的細胞.該實驗首先測定了

2、SMMC-7721細胞分別在45℃~52℃培養(yǎng)1h,又在37℃培養(yǎng)1h后細胞的存活率,選擇存活率在95﹪以上的溫度進一步測定熱處理1h 37℃培養(yǎng)36h后細胞的存活率.用PCR技術從大鼠GRcDNA質粒中及SMMC-7721細胞基因組中分別獲得大鼠GR跨外顯子(現人GR跨3,4,5外顯子的同源性在85﹪以上)及人GR內含子C,E的DNA片段插入轉錄載體,以之為模板進行體外轉錄并標記地高辛,用制備的反義RNA探針,對經不同處理的SMMC-

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