抗草甘膦基因植物雙價表達載體的構(gòu)建.pdf

1、本文針對目前報道的抗草甘膦轉(zhuǎn)基因作物中，強組成型啟動子驅(qū)動抗草甘膦基因在轉(zhuǎn)基因植物的所有部位和所有發(fā)育階段都表達，增加植株代謝負擔，對植物的產(chǎn)量可能引起負效應(yīng)的這一問題，利用Ag2這種草甘膦脅迫誘導(dǎo)啟動子來驅(qū)動epsps基因，只在草甘膦噴施后高效表達對草甘膦的抗性。另外，同時利用具有組織特異性的啟動子RuBP，使epsps基因在植物草甘膦農(nóng)藥田間噴施主要部位葉片中高效表達，應(yīng)可以進一步增強轉(zhuǎn)基因植物的抗草甘膦能力，但又不致過多地增加轉(zhuǎn)基

2、因植物的代謝負擔，以利培育高抗草甘膦且農(nóng)藝性狀優(yōu)良的轉(zhuǎn)基因植物。 因此，本文分別以pB1121-E-M-Bt(Kanar)和pB1121-CP4E(Kanar)質(zhì)粒為基礎(chǔ)，通過載體pUC19及對EcoR I位點的接頭改造，構(gòu)建了由RuBP啟動子和新發(fā)現(xiàn)的誘導(dǎo)型啟動子Ag2共同調(diào)控epsps基因的植物表達載體pGBI-Ag2EM-RuBPEM和pGBI-Ag2CP4E-RuBPCP4E，選擇標記為卡那霉素，通過凍融法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入